小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的研究

《小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的研究ResearchesonCallusInductionandDifferentiationofWheatMatureEmbryos杨筱指导教师姓名王化俊教授（甘肃农业大学兰州730070）学科专业名称作物遗传育种研究方向生物技术育种论文答辩日期2015年5月30日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席马建忠教授评阅人奚亚军教授张金文教授2015年6月甘肃农业大学2015届硕士学位论文摘要我国是农业大国，小麦在谷物栽培中位居首位。近年来，我国在生物

2、技术方面投入了大量的人力物力，使得转基因技术逐渐成为小麦品质改善等方面的一种重要的科研方法。尽管小麦成熟胚因其具有取材方便、不受季节和植株发育状态限制等优点而被用作外植体进行组织培养，然而成熟胚离体培养的诱导率及植株的再生能力比较低，这样就为后续的转基因工作带来了难度，因此小麦生物技术育种进程中亟需完成的关键点仍然是探索小麦成熟胚离体培养过程和再生苗发生频率的影响因素。本研究以小麦品种甘春24号、甘春20号和中麦175为材料，在前人研究的基础上，从不同预处理方式对成熟胚出愈率的影响及筛选PEG最佳处理浓度、诱愈及分化培养基中Cu2+、Fe

3、2+和Ag+不同浓度对成熟胚愈伤诱导率、绿苗率等的影响、分化培养基中2,4-D和6-BA、IAA和KT不同浓度配比对再生苗形成的影响，以及优化后的小麦成熟胚离体培养过程中各项生理指标和内源激素的变化等方面入手设计实验，现将本研究结果概括如下：1.三种不同的预处理（低温处理、PEG处理、CaCl2处理）均能促进小麦成熟胚进行脱分化，其中PEG处理是小麦种子预处理中效果最好的，依次是低温处理（LT）、CaCl2处理，中麦175在不同预处理下的愈伤组织形成率均是最高的，而甘春20号是预处理效果最差的；在本实验所设置PEG不同浓度中，350mg/

4、L处理效果最好。2.提高培养基中的Cu2+、Fe2+和Ag+浓度，均显著提高小麦成熟胚的愈伤诱导率、胚性愈伤诱导率、绿芽率和绿苗率，并于Cu2+为10μmol/L、Fe2+为70μmol/L和Ag+为65μmol/L时分别达到最大值，且随着三种金属离子浓度的继续升高，小麦成熟胚愈伤诱导率和绿苗率等都随之降低；Cu2+等金属离子对于不同品种产生的效应之间存在显著性差异。3.IAA/KT=0.1/1.0（mg/L）与2,4-D/6-BA=2/2(mg/L)对成熟胚再分化的处理效果都较好，但IAA和KT配比组合更有利于不定芽的分化形成；在不同激

5、素浓度配比处理下，中麦175的绿点及绿苗形成率均较高。4.随着小麦成熟胚培养时间的推移，SOD、POD、CAT活性及可溶性蛋白含量均呈现先上升再下降的趋势，并于培养第14-16天达到峰值，之后随着胚性愈伤组织形成绿苗而逐渐降低，APX则是随着愈伤组织的发育，活性逐渐上升，I甘肃农业大学2015届硕士学位论文在绿苗形成的时候达到最大值；不同品种再生苗除APX外，其余生理指标之间均差异显著，且不同品种再生苗和对照苗之间各生理指标有相似的规律。5.ZT和ABA含量在绿芽形成前是逐渐上升的，第21d达到最大值，之后便呈现下降的趋势，其中ABA在培

6、养初期含量极低；IAA含量在愈伤形成时期就保持在较高的水平，且在第14d达到峰值，随后下降；ABA/IAA则是先下降后上升，于不定芽形成时期达到最大值。关键词：小麦；成熟胚；组织培养；影响因素；生理指标；内源激素II甘肃农业大学2015届硕士学位论文SummaryOurcountryisagriculturalcountry,thewheatisinthefirstplaceofgraincultivationasthemaincrop,inrecentyears,wehasinvestedalotofmanpowermaterialre

7、sourcesinthebiologicaltechnology,makingthetransgenictechnologygraduallybecomeakindofimportantscientificresearchmethodstoimprovethewheatqualityetc,al.Inspiteofwheatmatureembryosareusedasexplantsfortheadvantagesthatconveniently,shortcycle,withoutbeinglimitedbytheseasonsandp

8、lantdevelopmentalstage,thecallusinductivityandplantregenerationofmatureembryosinvitroculturearel