玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立

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　　玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立　　：合适的受体材料是玉米成功转化的关键，本实验试图通过成熟玉米来诱导愈伤，为转化提供材料。选取生产上常用的几个玉米系为材料，参考相关文献，摸索组织培养条件将成熟胚诱导愈伤，来获得再生植株。关键词：玉米；成熟胚；愈伤诱导；植株再生基金项目：本文系宁夏大学校级青年教师科研启动基金。：Q943.1：A：1674-0432（2014）-02-26-1近年来，随着基因工程技术的不断深入，玉米的遗传转化也取得了一些进步，合适的受体材料是玉米转化成功的关键，所以必须对受体材料进行鉴定和筛选，保证转化后能够得到可育的植株。幼胚是玉米遗传转化中使用最多的外植体 [1，2]。但幼胚组织培养受基因型的控制[3]，而且取材的时间受到严格的季节限制。能否通过成熟胚诱导愈伤获得再生植株呢，Green等最早报道了玉米的成熟胚可诱导愈伤组织，但未能获得再生植株。o17的成熟胚诱导愈伤，使用的培养基为含有1～2毫克/升2，4-D的MS，愈伤组织诱导频率为23%～100%，其中Mo17诱导频率最高，并且B73和Mol7中有4%～5%的外植体得到了再生植株。Huang等[5]利用七个自交系材料进行了成熟胚诱导实验，由成熟胚诱导愈伤组织再生植株的效率达到了19.8%～32.4%。随后Diaa等人[6]也将成熟胚纵切，用含2，4-D的LS培养基诱导出愈伤并获得再生植株。选取生产上常用的几个玉米品系为材料，参考相关文献，摸索组织培养条件将成熟胚诱导愈伤，来获得再生植株。1材料和方法1.1材料供试材料为农大108、X08、X090、Q319和X178，基本培养基为LS诱导培养基，N6培养基。1.2方法用升汞将玉米成熟种子消毒，在无菌水中浸泡24小时后，在LS培养液中再浸泡48小时，然后转到MS培养基上。待出芽后将芽切掉，将种子纵切，放到LS愈伤诱导培养基上，进行愈伤诱导。待长出愈伤后，将其转到N6的分化培养基上，分化出幼苗。2结果与分析表1五种玉米品系成熟胚诱导再生植株数量 五个玉米品系中均能长出愈伤，其中农大108效果最好，具体情况见表1，但当将愈伤组织转移到分化培养基上后，愈伤长势变慢，颜色变褐。有的愈伤转移到分化培养基上之后，部分变绿，但不能分化，仅有农大108的愈伤分化出幼苗。3结论通过本实验的研究表明，玉米纵切后愈伤的诱导率明显增加，但是分化出植株的比例很低，可能跟后期所用的诱导分化培养基有关；该实验还表明基因型是影响愈伤诱导率的决定性因素，基因型不同愈伤组织的诱导率和分化率都有很大的差异，本实验中农大108做为供试材料，诱导愈伤数量最多，同时也是唯一分化出幼苗的，供试材料中的X090是愈伤诱导率最低的，而且诱导出的愈伤很快褐化，不能再生。