农杆菌介导的大豆子叶节法体系优化及大豆中一个wrky28-like基因的克隆与功能分析

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1、|’嚇?為请泉養义4■-■■,■学术型硕壬学位论文?<农杆菌介导的大豆子叶节法体系优化及大豆中一个奶班72和Me基因的克隆与功能分析王婷择、.....-.',??;f.-'指导教师盖钩溢教授、.--.'?■学科口类提._^:专W《祿作物溃传育种研巧方向梢物巧甚因答辩日期二〇—五年六月1OPTIMIZATION0¥-MEDIKI^DAGROBACTERIUMSOYBE乂NCOTYLEDON乂RYNODETRANSFORMATION&CL

2、ONINGANDANALY別SOF乂GENEINSOYBEANByWanTinlinggg乂DissertationSubmi村edtoNanjingAgricultureUniversityinPartialFulfillmentofdieReuirementsq’化rMastersDegreeSuervisedpbyProf.Gai化nlyNaninAriculturalUniversitjggyNanin210095P.R.Chinajg,2015.05原创性声明

3、:所呈交的学位论文本人郑重声明,是本人在导师的指导下,独立进行研巧工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名:王攻^1〇巧年^月5日|学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有

4、关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密s/""(请在W上方框内打V)>>片学位论文作者(需亲笔)签名:王3女^年/月5日导师(需亲笔)签名;从/女年^月S日^换戶目录目录摘要1ABSTRACTIll缩胃词表VII第一章文献综述11大豆遗传转化研究现状111基因枪法1.1.2花粉管通道法21.3农杆菌介导法22体巧发生相关基因的研究进展62.1BabyBoom6tldon2.2Leaf

5、yCoe7y2AGAMOUS-il.3LkeS72.4WUSCHEL8?度r3W基因的研究进展83.1家族基因的研究现状93.2基因的研究现状104论文的主要研究意义和内容114.1优化大豆子叶节法的意义114.2研究Gm眠則基因的意义11115研究方案5111.大豆子叶节法体系优化5瓜基因的克隆与功能鉴定13.2第二章农巧菌介导的大豆子叶节法体系的优化151实验材料151.1受体1512菌株与载体15.1.3试剂1511.4主要仪器设备和耗材6I农杆

6、菌介导的大豆子叶节法体系优化及大豆中一个基因的克隆和分析2实验方法1621公n公16.公M基因的转化220.2子叶节法的因素优化3结果与分析213.1公n公公A/转他结果21.2253子叶节法的因素优化4麗31一化firing-/化e基因的克隆与功能鉴定第云章大豆中个W巧1实验材料331.1植物材料巧1.2菌株与载体331.3引物、测序33、试剂1.4主要仪器设备与耗材332基因的克隆及分析332.1基因克隆342.2生物信息学分析362.3亚细胞定位载体构建%

7、2.4组织表达分析392.5胁迫表达分析403Gw献e在拟南芥中的过表达413.1植物表达载体构建413.2转化拟南芥423.3拟南芥在逆境胁迫下的表型分析434结果与分析44—41W化口^-/.Gw8zfe基因的克隆与分析444.2GwWi?足。沪"Ae基因的表达分析514.3转化e的纯合了3代拟南芥表型分析53566第四章全文总结与讨论69本研究创新之处71参考文献73附录85致谢93摘

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1、|’嚇?為请泉養义4■-■■,■学术型硕壬学位论文?<农杆菌介导的大豆子叶节法体系优化及大豆中一个奶班72和Me基因的克隆与功能分析王婷择、.....-.',??;f.-'指导教师盖钩溢教授、.--.'?■学科口类提._^:专W《祿作物溃传育种研巧方向梢物巧甚因答辩日期二〇—五年六月1OPTIMIZATION0¥-MEDIKI^DAGROBACTERIUMSOYBE乂NCOTYLEDON乂RYNODETRANSFORMATION&CL

2、ONINGANDANALY別SOF乂GENEINSOYBEANByWanTinlinggg乂DissertationSubmi村edtoNanjingAgricultureUniversityinPartialFulfillmentofdieReuirementsq’化rMastersDegreeSuervisedpbyProf.Gai化nlyNaninAriculturalUniversitjggyNanin210095P.R.Chinajg,2015.05原创性声明

3、:所呈交的学位论文本人郑重声明,是本人在导师的指导下,独立进行研巧工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名:王攻^1〇巧年^月5日|学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有

4、关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密s/""(请在W上方框内打V)>>片学位论文作者(需亲笔)签名:王3女^年/月5日导师(需亲笔)签名;从/女年^月S日^换戶目录目录摘要1ABSTRACTIll缩胃词表VII第一章文献综述11大豆遗传转化研究现状111基因枪法1.1.2花粉管通道法21.3农杆菌介导法22体巧发生相关基因的研究进展62.1BabyBoom6tldon2.2Leaf

5、yCoe7y2AGAMOUS-il.3LkeS72.4WUSCHEL8?度r3W基因的研究进展83.1家族基因的研究现状93.2基因的研究现状104论文的主要研究意义和内容114.1优化大豆子叶节法的意义114.2研究Gm眠則基因的意义11115研究方案5111.大豆子叶节法体系优化5瓜基因的克隆与功能鉴定13.2第二章农巧菌介导的大豆子叶节法体系的优化151实验材料151.1受体1512菌株与载体15.1.3试剂1511.4主要仪器设备和耗材6I农杆

6、菌介导的大豆子叶节法体系优化及大豆中一个基因的克隆和分析2实验方法1621公n公16.公M基因的转化220.2子叶节法的因素优化3结果与分析213.1公n公公A/转他结果21.2253子叶节法的因素优化4麗31一化firing-/化e基因的克隆与功能鉴定第云章大豆中个W巧1实验材料331.1植物材料巧1.2菌株与载体331.3引物、测序33、试剂1.4主要仪器设备与耗材332基因的克隆及分析332.1基因克隆342.2生物信息学分析362.3亚细胞定位载体构建%

7、2.4组织表达分析392.5胁迫表达分析403Gw献e在拟南芥中的过表达413.1植物表达载体构建413.2转化拟南芥423.3拟南芥在逆境胁迫下的表型分析434结果与分析44—41W化口^-/.Gw8zfe基因的克隆与分析444.2GwWi?足。沪"Ae基因的表达分析514.3转化e的纯合了3代拟南芥表型分析53566第四章全文总结与讨论69本研究创新之处71参考文献73附录85致谢93摘

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