农杆菌介导大豆子叶节转化体系的优化及大豆耐铝毒候选基因gmstop1的克隆与功能分析

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1、一巧分类号Ｓ３３０．费音泉毒义羣！．｜‘｜－Ｖ、．‘－．．？？？．，—－■，＜Ｋ？．＿＊－－ｃ—，■．学术型硕壬学位论文＜？．．衣杆菌介导大豆子叶节转化体系的优化及大豆耐锅毒候选？？基因Ｇｗ５Ｊ＞９Ｐ／的克隆与功能分析Ａ亚辉－．．，？■＇■指导教师盖钩嫌教授■■＿＿；：／：？＇，学科口类农学＇＇．专业＇名称作物遗传育种ｉ：研究方向基因工程及分子遗传育种Ｖ．／亩■一．，答辩日期二０—五年六月

2、，■？．．、＾’一—？一一．一‘３一．一一？．一．；？‘．、．．．．？－Ｖ一＇节＞＇■‘Ａ、－＇，乂，Ｖ，．心’Ｖ．Ｖ－．■ＯＰＴＩＭＩＺＡＴＩＯＮＯＦ－乂ＧＲＯＢ乂ＣＴＥＲＩＵＭＭＥＤＩＡＴＥＤＣＯＴＹＬＥＤＯＮＮＯＤＥＴＲＡＮＳＦＯＲＭ乂ＴＩＯＮＩＮＳＯＹＢＥＡＮ乂ＮＤＣＬＯＮＩＮＧＡＮＤＦＵＮＣＴＩＯＮＡＬＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦ乂ＳＯＹＢＥＡＮ乂ＬＵＭＩＮＵＭ－ＴＯＸＩＣＩＴＹＴＯＬＥＲＡＮＴＣＡＮＤＩＤＡＴＥ

3、ＧＥＮＥＧｍＳＴＯＰｌＢｙＣｏｎｇＹａｈｕｉＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｆ：ｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｑＦｏｒＴｈｅＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅＳｕｅｒｖｉｓｅｄｐｂｙＰｒｏｆ．Ｇａｉ化ｎｉｙＮａｎｉｎｇＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｙＮａｎｉｎ２１００９５Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａｊｇ，Ｃｏｍｌｅｔｅｄｉｎ２０１５ｐ

4、原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：么变＾义ｖｒ年月灰日学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农

5、业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。。保密□，在年解密后适用本授权书本学位论文属于不保密＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：年公；３：＾月ｒ日、＾导师（需亲笔：皮年月ｒ日）签名目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＶ一第章文献综述１１大豆遗传转化的研究进展１１．１大豆再生体系的研究进展２１丄１不定芽器官发生再生体系２Ｕ．２体细胞胚胎发生再生体系３１．２大豆遗传转化

6、方法的研究进展４１．２．１农杆菌介导转化法４２１．．２基因枪转化法５１．２．３花粉管通道法５１．３影响农杆菌介导法转化的主要因素６１．１．３农杆菌菌株侵染能力６１．３豆基因型６．２大１．３．３筛选剂的选择７１．３．４添加剂的作用７１．４大豆遗传转化的展望８２植物耐侣毒的相关研究进展８２．１我国止壌侣毒现状８２．２侣毒对植物的危害９２．２．１铅对根部的影响９２．．２２锅对质膜的影响９２．２．３铅对光合作用的影响９２．３植物耐铅毒机制１０

7、２．３１．植物耐铅毒的生理机制１０２２植物耐铅毒的．３．分子机制１０３ＳＴＯＰ１巧指蛋白转录因子的研究进展１２１２３．１植物Ｃ２Ｈ２巧指蛋白的结构和功能３．２ＳＴＯＰ１转录因子的研究进展１４４本研究目的及意义１４农杆菌介导大豆子叶节转化体系的优化及大豆中一个耐铅毒候选基因ＧｍＳＴＯ／Ｖ的克隆与功能分析５技术路线１５第二章大豆遗传转化体系的研究１７１材料与试剂１７１．１试验材料１７１．２供试载体及菌株１７１．３供试试剂及主要仪器１７１１．３．主要仪器设备

8、１７１．３．２主要激素和试剂１７１．４培养基１７２实验方法与试验设计１８２．１大豆的遗传转化步驟１８２．１．１大豆种子的消毒１９２丄２大豆种子的吸胀