基于高能氧通道的量子点均相免疫荧光分析方法的建立与初步应用

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1、分类号密级UDC编号,似!似淨硕去学位论文基于高能氧通道的量子点均相免疫巧光分析方法的建立与初步应用EstablishmentandPrimaryApplicationofaNovelHomogeneousFluorescenceImmunoassaBasedOnuantumDotsandyQLuminescentOxygenChannel陈振华导师姓名刘天才硏究员;专业名称免疫学,培

2、养类型学术型论文提交日期2015年4月南方医科大学2012级硕去学位论文基于高能氧通道的量子点均相免疫巧光分析方法的建立与初步应用EstablishmentandPrimaryApplica村onofaNovelHomoeneousFluorescencegImmunoassaBasedOnuantumDotsandLuminescentyQOxyenChannelg课题来源:国家自然科学基金面上项目(81271W1)学位申

3、请人陈振华导师姓名刘天才专业名称免疫学培养类型学术型培养层次硕去所在学院生物技未学隐答辩委员会主席朱家勇教授答辩委员会委员何庆瑜教授吴英松教授罗树红教授于择教授2015年5月19日广州硕±学位论文基于高能氧通道的呈子点均相免疫巧光分析方法的建立与初步应用硕±研巧生:陈振华指导教师:刘天才研巧员摘要研巧背景与目的标记免疫学一,就是将标记技术和免疫学技术相结合进行分析测定的口学一、科,,是集基础医学实验技术

4、和临床应用于体的学科其基本原理是通过巧光素、酶、放射性核素或化学发光物质等标记抗体或抗原,将抗原抗体反应的高度特异性与各标记物的高灵敏、可测量性相结合,W检查体内各种生物活性物质的活性和浓度。常用的标记免疫学分析方法包括免疫巧光、酶免疫测定、免疫组化、放射免疫测定、化学发光免疫分析、时间分辨巧光免疫等。随着标记技术、单克隆抗体技术和分子生物学技术的不断发展与完善,标记免疫学己广泛应用于医学、农业、环境及舍品检测等多个领域。根据抗原抗体反应时,Li待测物是否均匀分散在液相体系

5、中,可:l将免疫分析技术分为均相免疫分析和非均相免疫分析。当中,常用的均相免疫分析方法有AlphaScreen、TRACE、LANCE。目前国内外广泛应用于临床的免疫诊断主要是传统的非均相分化例一如ELISA、快速试纸条法等。般而言,传统非均相分析的操作步骤繁琐、免疫反应体系缓慢、需要通过洗涂来分离结合的与未结合的抗原或抗体、耗费时、。间^^不易自动化等缺点与之相比,均相免疫分析技术因为省却了洗涂的步骤,可减少操作带来的误差,通常具有灵敏度髙、背景巧光值低、信噪比高、应用范

6、围广、性质稳定、便于操作、易于微型化自动化等化点。-feor甲胎蛋白(atoteinAFP又称甲种胎儿球蛋白,人类的甲胎蛋白是由4p,)号染色体长臂的AFP基因所编码的一种单链多狀糖蛋白。甲胎蛋白是主要在胎儿发育过程中,由卵黄囊和肝脏分泌,并经由肾脏排入尿液和羊水,并通过胎I摘要盘进入母体血液之中的白蛋白。甲胎蛋白的浓度峰值出现在胎儿时期,之后在8至12个月逐渐降低,并降至健康成人水平。正常情况下,甲胎蛋白浓度维持。在低水平如果母体血清或羊水中甲胎蛋白的浓度异常,提

7、示胎儿可能发育异、常,比如神经管缺损肠道闭锁、先天性肾病变、胎儿窘迫、死胎等。因此,一项非特异性指标虽然甲胎蛋白是,但母体血清或羊水的中甲胎蛋白浓度依然可W作为胎儿崎形的筛选指惊。临床上还常联合其他检测指标,将其应用于出生缺陷的产前筛査和诊断,,1^1期对疾病实现早发现、早干预有助于减少死亡。、率、提高存活率和大为普及优生优育另外,由于肝细胞癌卵黄囊和胚胎性肿瘤及部分肝外肿瘤患者可重新合成甲胎蛋白,诸多肝病皆可W伴有甲胎蛋白浓度的升高,因此甲胎蛋白常用于原发性肝癌或是其他非

8、肝癌恶性肿瘤,包括消化、呼吸、泌尿生殖等多系统器官恶性肿瘤的临床辅助检测指标。其次,甲胎蛋白还常用于肝炎、肝硬化等急慢性肝病诊断、病理变化和病程预后的监测。um一量子点QuantDotsDs)是(,Q种把粒子在H个空间方向上限制束缚住的具有量子限域效应的半导体纳米结构材料。它具有较宽激发谱、窄而对称的发射峰、抗光漂白性、Stokes位移大、较高量子产率、摩尔消光系数大等诸多光学持性,使之有望成为新型的巧光标记物用于现代均相

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