细胞缺氧／复氧模型的建立方法与应用.pdf

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1、８８南昌大学学报（医学版）２０１５年第５５卷第２期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｃｈａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ）２０１５，Ｖｏｌ．５５Ｎｏ．２细胞缺氧／复氧模型的建立方法与应用杜毓菁ａ，徐一心ｂ，王紫璇ｃ，石蕊ｄ，黄杉ａ（综述），万福生ｅ（审校）（南昌大学ａ．第二临床医学院２０１２级；ｂ．公共卫生学院２０１２级；ｃ．第二临床医学院２０１３级；ｄ．口腔医学院２０１２级；ｅ．基础医学院，南昌３３０００６）摘要：本文介绍了缺氧／复氧模型建立的基本方法并简述了几种常用建模细胞的缺氧特性。参阅国内外学者建模的研究，分析了缺氧复氧模型优劣与适用选

2、择原则。据此为实验室选择建模方法提出更多参考思路。关键词：缺氧／复氧；实验模型；应用研究；细胞中图分类号：Ｒ－３３２文献标志码：Ａ文章编号：２０９５－４７２７（２０１５）０２－００８８－０４犇犗犐：１０．１３７６４／ｊ．ｃｎｋｉ．ｎｃｄｍ．２０１５．０２．０２４犈狊狋犪犫犾犻狊犺犿犲狀狋犕犲狋犺狅犱狊犪狀犱犃狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狊狅犳犎狔狆狅狓犻犪／犚犲狅狓狔犵犲狀犪狋犻狅狀犕狅犱犲犾狊犪，犡犝犢犻狓犻狀犫，犠犃犖犌犣犻狓狌犪狀犮，犛犎犐犚狌犻犱，犎犝犃犖犌犛犺犪狀犪，犠犃犖犉狌狊犺犲狀犵犲犇犝犢狌犼犻狀犵（ａ．２０１２犌狉犪犱犲狅犳狋犺犲犛犲犮狅狀犱

3、犆犾犻狀犻犮犪犾犕犲犱犻犮犪犾犆狅犾犾犲犵犲；ｂ．２０１２犌狉犪犱犲狅犳犛犮犺狅狅犾狅犳犘狌犫犾犻犮犎犲犪犾狋犺；ｃ．２０１３犌狉犪犱犲狅犳狋犺犲犛犲犮狅狀犱犆犾犻狀犻犮犪犾犕犲犱犻犮犪犾犆狅犾犾犲犵犲；ｄ．２０１２犌狉犪犱犲狅犳犛狋狅犿犪狋狅犾狅犵犻犮犪犾犆狅犾犾犲犵犲；ｅ．犅犪狊犻犮犕犲犱犻犮犪犾犆狅犾犾犲犵犲，犖犪狀犮犺犪狀犵犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犖犪狀犮犺犪狀犵３３０００６，犆犺犻狀犪）犃犅犛犜犚犃犆犜：Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｄｅｓｃｒｉｂｅｓｔｈｅｂａｓｉｃｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓｏｆｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎｍｏｄｅ

4、ｌｓａｎｄｏｕｔｌｉｎｅｓｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｅｖｅｒａｌｔｙｐｅｓｏｆｃｏｍｍｏｎｍｏｄｅｌｉｎｇｃｅｌｌｓ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｓｔｕｄｉｅｓａｂｒｏａｄ，ｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓ，ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓａｎｄｓｅｌｅｃｔｉｏｎｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎｍｏｄｅｌｓａｒｅａｎａｌｙｚｅｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙｃｈｏｉｃｅｏｆｍｏｄｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓ．犓犈犢犠犗犚犇犛：ｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ；ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｏｄ

5、ｅｌ；ａｐｐｌｉｅｄｒｅｓｅａｒｃｈ；ｃｅｌｌ在缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重，法、模拟缺血／再灌注液培养法、液体石蜡避氧法、安甚至发生不可逆性损伤的现象称为缺血再灌注损伤宁包厌氧法等，化学性的细胞Ｈ／Ｒ比较少见，主要（ｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ，ＩＲＩ）。缺氧／复氧模以连二亚硫酸钠耗氧法（Ｎａ耗氧法）为代表。２Ｓ２Ｏ４型（ｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，Ｈ／Ｒ）是体外从细胞水１．１混合气体培养法［１］平研究ＩＲＩ的理想模型。１９９０—２０１０年，在东亚混合气体培养法是目前建立Ｈ／Ｒ最广泛的方与太平洋地区缺血性心脏

6、病造成的健康损失上升了法之一，其特点是按一定比例混合惰性气体（Ｎ２或［２］７６％。由此可见，研究如何减轻ＩＲＩ刻不容缓。Ａｒ）和ＣＯ２气体后通入一个装有实验细胞的密闭盒目前相关研究着重于介绍构建模型的方法和原理，子，使其内原有气体排空形成无氧环境即为缺氧；培本文则在此基础上结合常用建模细胞的缺氧特性进养一定时间后再进行正常培养即为复氧。此法常用［３］一步阐明细胞Ｈ／Ｒ模型的建立方法与应用，为研气体罐、气体混合器和密闭培养盒串联建模，也有［４］究人员提供更全面的建模参考思路。实验室自制密闭盒。前述的密闭培养盒是一种仅含有一个出气孔和一个入气孔的密闭盒子，当气体１

7、犎／犚的建立（Ｎ或Ａｒ、ＣＯ）充满盒子后同时夹闭出气孔和入２２Ｈ／Ｒ主要分为物理法和化学法。物理性Ｈ／Ｒ气孔，即可实现持续缺氧培养。该盒子可购买亦可［５］较为常见，且应用广泛，常用的方法有混合气体培养自制，市面上出售的三气培养箱为机器控制气体收稿日期：２０１４１００９作者简介：杜毓菁（１９９３—），女，本科生，主要从事心血管分子机制的研究。杜毓菁等：细胞缺氧／复氧模型的建立方法与应用８９比例，使用方便、精确，但仪器昂贵一般实验室难以［１４］养盒。参照杨轶等的方法首先投放安宁包，安宁［６］普及。气体浓度比例常用５％ＣＯ２和９５％Ｎ２，也有包可迅速吸收氧气，１

8、ｈ内将密闭培养盒中的氧气［７］［２］某