基于量子点的新型均相荧光免疫分析技术.pdf

《基于量子点的新型均相荧光免疫分析技术.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第8卷第6期中国科技论文Vo1．8No．62013年6月CHINASCIENCEPAPERJune2013基于量子点的新型均相荧光免疫分析技术陈玫君，陈振华，吴英松，任志奇，李思雯，刘天才(南方医科大学生物技术学院，广州510515)摘要：研究一种检测人血清中癌胚抗原(CEA)的新型量子点均相免疫分析方法。制备还原型谷胱甘肽包被的水溶性量子点(QDs)，偶联上抗CEA单克隆抗体，使异硫氰基荧光素(FITC)偶联上另一株抗CEA单克隆抗体，采用双抗体夹心法模式，充分利用两株抗体与CEA抗原的相互作用，从而验证QDs、F丌C两者与抗体偶联的生物活性，并研究QDs用于均相荧光共

2、振能量转移(HFRET)免疫分析中的可行性与实用性。结果表明，FITC与QDs之间能够发生能量转移，其荧光共振能量转移信号与CEA浓度成线性相关，其工作曲线为LogY一2．504+0．154LogX(r2—0．98197，P一0．002)，并计算出其分析灵敏度为0．4ng／rnL。该新型均相荧光免疫分析方法具有不需冲洗掉游离荧光标记物、灵敏度高等优势，为今后实现快速便捷、多通道、高灵敏度、微量化、自动化及高通量化的生物医学传感技术和现代免疫分析技术提供科学依据。关键词：量子点；双抗体夹心法；荧光共振能量转移；均相荧光免疫分析中图分类号：R446．61文献标志码：A文章编号

3、：2095—2783(2013)06—0487—05Anovelquantum-dot-basedhomogeneousfluoroimmunoassaytechnologyChenMeijun，ChenZhenhua，WuYingsong，RenZhiqi，LiSiwen，LiuTiancai(SchoolofBiotechnology，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou，510515，China)Abstract：Anovelquantum-dot-basedhomogeneousfluoroimmunoassaytechnolog

4、yhasbeenstudiedfordetectionofcarcinoem—bryonicantigen(CEA)inhumanserum．Water-solublequantumdots(QDS)werepreparedandcoatedwithanti-CEAmonoclonalantibody(McAb)，andanotheranti-CEAMcAbwaslabeledwithFluoresceinisothiocyanate(FITC)．Theactivitiesofthesela—beledantibodieswereanalyzedbyfluorescenc

5、eresonanceenergytransfer(FRET)．TheconcentrationsofCEAweremeasuredbyFRETbetweenFITCandQDswiththetwo-antibodysandwichsystem．Theresultsindicatedthatquantumdotscouldbeappliedinhomogeneousfluoroimmunoassay．ThesignalsofFRETwereproportionaltotheconcentrationsofCEAwithLogY一2．504+0．154LogX(r2—0．98

6、197，P一0．002)；thecalculatedsensitivitywas0．4ng／mL．Thenovelhomogeneousfluorescenceimmunoassaydoesnotrequiretowashawaythefreefluorescentconjugateswithhighsensitivity．Itprovidesascientificbasisforthedevelopmentofrapidandconvenientbiomedicalsensortechnologyandmodernimmunoassaytechnologywithmul

7、ti-channel，highsensitivityandhigh-throughput．Keywords：quantumdots；two-antibodysandwichsystem；fluorescenceresonanceenergytransfer；homogeneousfluorescenceimmunoassay癌胚抗原(CEA)是一种多糖蛋白复合物，属于究潜质。目前，关于FRET的研究，还停留在理论非器官特异性肿瘤相关抗原，是肿瘤诊断和病情检上，大多数就是集中在共振能量转移的定性检测，而测中最常用的一种肿瘤标志物