ep_2受体激动剂butaprost和雌激素对奶牛输卵管上皮细胞tgf-β3和lif的影响作用研究

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1、／分类巧Ｓ８５９．７学校代码１０１２９ＵＤＣ６３６．０９学号２０１２２１６００Ａ書寺名嗦乂＃硕±学位论文ＥＰ２受体激动剂Ｂｕｔａｐｒｏｓｔ和雌激素对奶牛输卵管上皮细胞ＴＧＦ－目３和ＬＩＦ的影响作用研究Ｅｆｆｅｃｔｏｆ￡？ＲｅｃｅｔｏｒＡｏｎｉｓｔＢｕｔａｒｏｓｔａｎｄＥｓｔｒｏｅｎｏｎ２ｐｇｐｇＥｘｒｅｓｓｏｎｏｆ－ＢｏｖｄｕｃｔｉＴＧＦ目３ａｎｄＬＩＦｉｎｉｎｅＯｖｉＥｉ化ｄｉａｌＣｅｌｌｐｐ申请人：王毛毛．学科口类；农学学科专业：基础兽医学研究方向：兽医药理学与毒理学指导教师：曹金山

2、教授二〇－五年六月论文提交日期：—■二＇，，．．■内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处一，本人承担切相关责任。论文作者签名；不全如日期：７Ｖ＆、心Ｉ今内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书

3、本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，目Ｐ：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：ｉｓ、日期ｏ、６！＾：ｙ摘要胃的：研究旨在揭示雌激素、前列腺素类化合物、前列腺素受体途径对奶牛

4、－输卵管上皮细胞分泌转化生长因子ｅ，（ＴＧＦ３、：Ｐ）白血病抑制因子化Ｉ巧有无协同调控作用。为临床上合理用药治疗奶牛输卵管化能奈乱引起的不巧症并提高奶牛繁巧能力提供理论依据。方法；１）利用膜酶消化法及机械法成功培养奶牛输卵管上皮细臘第四代细胞为实验用细胞２ＰＣＲ（ｂｕｔａｎ。）采用英光定量技术检测雌激素、ｐｒｏｓｔ、巧｜朵美ｈ－辛、４ｈ、如、］６ｈ、２４ｈ、４如）ＴＧＦ）作用不同时间口对奶牛输卵管上皮细胞—Ａ－目３、ＬＩＦｍＲＭ衷达的影响。３）分别用不同浓度Ｂｕｈｐｒｏｓｔ（ｌＯｌｃｎｎｏｌ／Ｌ）＂和雌激素１（Ｔｍｏｌ／Ｌ作用于奶牛输卵管上皮细胞，然后

5、用巧光定量ＰＣＲ技术检－ＦｍＲＮ测ＴＧＦ目３、ＵＡ表达的变化。４）采用Ｗｅｓ１：ｅｒｎＢｌｏｔ法检测（雌激素、ｂｕ化ｒｏｓ－ｐｔ、嘲噪美辛）对奶牛输卵管上皮细胞中ＴＧＦ目３合成分泌的影响。５）采用ＥＬＴＳＡ法测奶牛输卵管上皮细胞中ＬＴＦ的合成分泌。结果，：首先，体外成功培养了奶牛输巧巧上皮细胞。其次雌激素作用巧、－２４和４８ｈ时对奶牛输卵管上皮细胞ＴＧＦ目３的表达量与空白姐巧比均极显著戶（＜化０１）升窩，４ｈ的表达量显著性的降低（戶＜化０５）；且ＥＰ，受体激动剂ｂ山：ａｐｒｏｓｔ和雌激素有协同调控ＴＧＦ－３Ｐ的效应。加入吗Ｉ噪芙辛后能有效的抑制内源性

6、前列－腺素对了６。０３表达的作用。雌激素（无呵嗦美辛预处理）作用２ｈ对奶牛输卵管上皮细胞ＵＦ的表达量与空白组相比极通著巧升高（片＜化０１），且２ｈ时ＬＩＦｍＲＮＡ的表达量达到最大值。嘲峨芙辛预处理后，ＬＩＦｍＲＮＡ的表达量与无嘲峨美辛处理纽相比均升商。第Ｈ，用不同浓度的ｂｕｔａｐｒｏｓｔ刺激奶牛输卵管上皮细－胞盾，Ｔ（；ＦＰ３、ＬＩＦｍＲＮＡ表达量且呈现浓度依赖性。第四ｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ，Ｗ检测－３Ｆ－３ｍＲＮＡ一ＳＡＴＧＦｅ的表达与ＴＧｅ检测结果基本致。第出，比Ｉ检测奶牛输卵暂上皮细胞中ＬＩＦ的结果与ＬＩＦｍＲＮＡ检测结果相符。结

7、论：ＴＧＦ－１雌激素能够促进奶牛输卵管上巧细胞中细胞因子目３、ＬＩＦｍＲＮＡ的表达。ｔａｒｏｓｔ对奶牛输卵管上皮细胞中细胞因子ＴＧＦ－２雌激素和化受体激动剂Ｂｕｐ目’，：，ｍＲＮＡ的表达有协同调控作用对奶牛输卵管上皮细化中细胞因子ＬＩＦｍＲＮＡ的表达有巧抗作用。ＴＧＦ－３３内源性前列腺素对奶牛输卵管上皮细胞细胞因子３ｍＲＮＡ的表达有促进ＵＦｍ胁Ａ的表达巧。作用，对抑制作用３白ｕｔａｒｏｓｔ