雷公藤内酯醇对耐顺铂卵巢癌细胞株(skov3ddp)体外活性影响机制的初步探讨

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得壶昌丛堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：铷焰良签字日期：pB年6月夕日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内

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3、应用价值，为使雷公藤内酯醇有望成为失去手术机会的晚期或耐化疗卵巢癌病人的有效治疗和／或增敏药物提供体外实验与理论依据。方法：1．用不同浓度(0nM、12．5nM、25nM、50nM、100nM)的TPL分别处理耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3／DDP24h、48h后，四甲基偶氮唑蓝(MTT)1法检测SKOV3／DDP细胞的存活率。2．用不同浓度(0nM、12．5nM、25nM、50nM、100nM)的TPL分别处理耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3／DDP24h后，应用流式细胞术检测TPL对SKOV3／DDP细胞凋亡率的影响。3．100nMTPL处理SKOV3／DDP细胞

4、lh、12h、24h后，应用流式细胞术检测SKOV3／DDP细胞内的活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)水平。4。分别以5mmol／LN一乙酰半胱氨酸(N．acetyl．L．cystein，NAC)、100nmol／LTPL单独处理SKOV3／DDP细胞24h及应用5mmol／LNAC预处理lh后再加入100nmol／LTPL处理SKOV3／DDP细胞24h，流式细胞术检测TPL联合NAC作用SKOV3／DDP细胞24h后细胞凋亡率及细胞内ROS水平的变化。5．用不同浓度(0nM、12．5nM、25nM、50nM、100nM)的TPL分别处理耐顺铂人上皮

5、性卵巢癌细胞株SKOV3／DDP24h后，Westernblot方法检测SKOV3／DDP细胞中核因子．r,B(NF．出)p65核蛋白、Bcl一2、Caspase3蛋白水平的表达变化。结果：1．用不同浓度(12．5nM、25nM、50rtM、100nM)的TPL分别处理SKOV3／DDP细胞24、48h后，细胞平均存活率分别为95．192％士0．048％、87．106％土0．379％、65．9430／秸：0．112％、56．426％+0．285％、77．165％-4：0．228％、64．313％士0．656％、34．452％士0．798％、24．824％士】．450％。II摘要

6、2．用不同浓度(12．5nM、25nM、50nM、100riM)的TPL分别处理SKOV3／DDP细胞24h后，细胞平均凋亡率分别为12．530／壮0．42％、22．87％土0．3l％、35．470／吐0．16％、52．19％士O．27％。3．100nmol／LTPL分别作用SKOV3／DDP细胞1h、12h、24h后，ROS水平较阴性对照组相比分别增加3．49-士0．21倍、7．72--b0．42倍、9．17士0．76倍。4．5mmol／LNAC作用SKOV3／DDP细胞24h后，SKOV3／DDP细胞内ROS水平和细胞凋亡率较对照组相比差异无统计学意义(P>O．05)。10

7、0nmol／LTPL作用SKOV3／DDP细胞24h后，SKOV3仍DP细胞ROS的产生是对照组的9．41士0．57倍，细胞凋亡率为48．2％4-1．2％。SKOV3／DDP细胞经5mmol／LNAC预处理l小时后，再加入100nmol／LTPL作用24h，SKOV3／DDP细胞ROS的产生是对照组的2．72士O．35倍，细胞凋亡率为21．6％4-1．2％。5．Westernblot结果显示，随着TPL浓度的增大，SKOV3／DDP细胞内NF．出p65核蛋白、Bcl．2表达下降，caspas