miR-1271对卵巢癌SKOV3DDP细胞顺铂耐药的影响及其机制 优先出版.pdf

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1、第27卷第2期江苏大学学报(医学版)Vol．27No．22017年3月JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition)Mar．2017miＲ-1271对卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药的影响及其机制1，211134王广洲，秦闫燕，卢洁，苏兆亮，朱伟，陈建国(1．江苏大学医学院，江苏镇江212013;2．苏北人民医院医学检验科，江苏扬州225001;3．江苏省人民医院肿瘤科，江苏南京210029;4．江苏大学附属人民医院检验科，江苏镇江212002)［摘要

2、］目的:研究miＲ-1271在卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药形成中的作用。方法:采用实时定量PCＲ法检测卵巢癌SKOV3/DDP细胞和母代SKOV3细胞中miＲ-1271的表达，并通过蛋白质印迹法检测上述细胞X连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitorofapoptosisprotein，XIAP)的表达。构建XIAP3'UTＲ荧光素酶报告质粒验证miＲ-1271的靶基因，在耐药细胞株中瞬时转染miＲ-1271模拟物以观察上调miＲ-1271对卵巢癌SKOV3/DDP细胞XIAP

3、表达及顺铂耐药的影响，并运用流式细胞术检测转染miＲ-1271模拟物后SKOV3/DDP细胞的凋亡率。结果:miＲ-1271在卵巢癌SKOV3/DDP细胞中呈低表达，抗凋亡蛋白XIAP在卵巢癌SKOV3/DDP细胞中呈高表达，荧光素酶报告实验证实XIAP是直接受miＲ-1271调控的靶基因，在耐药株中上调miＲ-1271显著抑制XIAP蛋白表达水平，显著增加细胞对顺铂的敏感性，并显著增加细胞对顺铂诱导的凋亡。结论:miＲ-1271靶向抑制XIAP表达可增加卵巢癌SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感

4、性。［关键词］miＲ-1271;X连锁凋亡抑制蛋白;顺铂耐药［中图分类号］Ｒ329．2［文献标志码］A［文章编号］1671－7783(2017)02－0118－05DOI:10．13312/j．issn．1671-7783．y170010［引用格式］王广洲，秦闫燕，卢洁，等．miＲ-1271对卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药的影响及其机制［J］．江苏大学学报(医学版)，2017，27(2):118－122．EffectofmiＲ-1271oncisplatinresistanceinhuma

5、novariancancercelllineSKOV3/DDPanditspotentialmechanism1，211134WANGGuang-zhou，QINYan-yan，LUJie，SUZhao-liang，ZHUWei，CHENJian-guo(1．SchoolofMedicine，JiangsuUniversity，ZhenjiangJiangsu212013;2．DepartmentofLaboratoryMedicine，NorthernJiangsuPeople'sHospit

6、al，YangzhouJiangsu225001;3．DepartmentofOncology，JiangsuPeople'sHospital，NanjingJiangsu210029;4．DepartmentofLaboratoryMedicine，AffiliatedPeople'sHospitalofJiangsuUniversity，ZhenjiangJiangsu212002，China)［Abstract］Objective:Toinvestigatethepossibleroleo

7、fmiＲ-1271inthedevelopmentofcisplatinre-sistanceinhumanovariancancercelllineSKOV3/DDP．Methods:Usingquantitativereal-timePCＲa-nalysisformiＲNAandWesternblottingtodetecttheexpressiondifferenceofmiＲ-1271andX-linkedin-hibitorofapoptosisprotein(XIAP)between

8、cisplatin-resistanthumanovariancancercelllineSKOV3/DDPanditsparentalSKOV3cellline，respectively．ConstructingXIAP3'-untranslatedregion-basedlu-ciferasereporterplasmidstoverifythetargetgeneofmiＲ-1271．TransienttransfectionofmiＲ-1271mimicwasusedtoupregula