格尔德霉素及其顺铂联合应用对人卵巢癌细胞skov3及skov3ddp耐药性影响的研究

《格尔德霉素及其顺铂联合应用对人卵巢癌细胞skov3及skov3ddp耐药性影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学硕士学位论文格尔德霉素及其顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3及SKOV3/DDP耐药性影响的研究姓名：孙广宇申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：张正茂；单保恩201203中文摘要格尔德霉素及其与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3及SKOV3／DDP耐药性影响的研究摘要目的：卵巢癌是妇科恶性肿瘤之一，我国卵巢癌发病率居妇科肿瘤第三位。目前对于卵巢癌的认识和诊断治疗方法取得了较大进展，但是总生存率仍然徘徊不前。肿瘤减灭术术后辅助化疗是治疗卵巢癌的主要方法，但由于化疗药物的多药耐药

2、性(MDR)，致使后续化疗失败。因此研究肿瘤耐药机制，逆转耐药成为近年来研究的热点与难点。研究发现，在体内作为分子伴侣的热休克蛋90(HSP90)对肿瘤的发生发展起着重要作用，格尔德霉素(GA)是一种特异性的HSP90抑制剂，在体内可阻断肿瘤赖以生存的信号通路网络，有一定逆转多药耐药性的作用。本研究旨在探讨格尔德霉素及其与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3及顺铂耐药细胞株SKOV3／DDP耐药性的影响及其机制，为卵巢癌耐药机制提供基础实验依据。．方法：1MTT法检测不同浓度顺铂(3，6，9I_t

3、g／mL)、格尔德霉素(20、40、200、400、2000nmol／L)和格尔德霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3及顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3／DDP的增殖抑制作用，并计算格尔德霉素联合顺铂的逆转倍数RF，RF=IC50(顺铂)／IC50(GA+顺铂)。2RT-PCR法检测顺铂、格尔德霉素及格尔德霉素联合顺铂处理SKOV3和SKOV3／DDP细胞前、后耐药基因LRP和GST．兀mRNA的表达情况。3Western．blot法检测顺铂、格尔德霉素及格尔德霉素联合顺铂处理SKOV3和SKOV

4、3／DDP细胞前、后细胞内耐药基因LRP和GST-兀的蛋白表达情况。结果：1格尔德霉素(20、40、200、400、2000nmol／L)对SKOV3、SKOV3／DDP细胞具有显著的增殖抑制作用，而且格尔德霉素对两种细胞的增殖抑制作用无明显差异；随着格尔德霉素浓度的增加，其对SKOV3和SKOV3／DDP中文摘要的增殖抑制作用逐渐增强，且呈剂量依赖性。不同浓度顺铂(3，6，9pg／mL)分别处理SKOV3和SKOV3／DDP细胞48h后，对两种细胞均有明显增殖抑制作用，呈一定的剂量依赖关系，顺铂

5、对SKOV3细胞的抑制作用较SKOV3／DDP明显；格尔德霉素联合顺铂的逆转倍数分别为2．24、5．52，表明格尔德霉素联合顺铂对SKOV3和SKOV3／DDP细胞亦有明显的增殖抑制作用，抑制作用均高于格尔德霉素和顺铂的单独应用，且可逆转顺铂的耐药性。2RT-PCR检测基因水平上，LRP、GST-7rrnRNA在SKOV3和SKOV3／DDP细胞中的变化，结果显示：格尔德霉素、顺铂及格尔德霉素联合顺铂作用于SKOV348h后，各组的LRP、GST-兀表达均下降，与对照组比有显著差异(氏0．05)，

6、且格尔德霉素联合顺铂组下调LRP、GST-7rmRNA两种耐药基因的作用明显高于单药格尔德霉素和顺铂组；SKOV3／DDP细胞经上述药物处理48h后，格尔德霉素组及格尔德霉素联合顺铂组的LRP、GST-'r表达下降，与对照组相比有显著差异(氏O．05)，且格尔德霉素联合顺铂组LRP、GST-TrmRNA的下调作用强于单药格尔德霉素组，而在顺铂组，两种耐药基因的表达无明显降低，与对照组相比无明显差异(胗0．05)。3Western．blot法检测蛋白水平上，LRP、GST-7t蛋白在SKOV3和SK

7、OV3／DDP细胞中的变化，结果显示：SKOV3细胞经格尔德霉素、顺铂及格尔德霉素联合顺铂作用48h后，各组的LRP、GST-尢表达均降低，与对照组比有显著差异(氏O．05)，且格尔德霉素联合顺铂组下调LRP、GST-r【两种耐药基因的作用明显高于单药格尔德霉素和顺铂组；SKOV3／DDP细胞经上述药物处理48h后，格尔德霉素及格尔德霉素联合顺铂组的LRP、GST-rr表达下降，与对照组比有显著差异(P

8、降低，与对照组相比，比值无明显差异(胗0．05)。结论：l格尔德霉素联合顺铂对SKOV3和SKOV3／DDP细胞有明显的增殖抑制作用，两药联合应用对SKOV3和SKOV3／DDP细胞的增殖抑制作用均明显强于格尔德霉素和顺铂单独使用，且可显著逆转DDP的耐药性。2SKOV3和SKOV3／DDP细胞中耐药基因LRP、GST-，rmRNA和蛋2中文摘要白均有表达，但是在SKOV3／DDP细胞中耐药基因LRP、GST-兀mRNA和蛋白的表达更强。3格尔德霉素联合顺铂可下调耐药基因LRP、G