大鼠肾缺血再灌注损伤模型中prxv和cat的表达变化

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：蛎两导师签章：?：。0二级学院领导盖章：≮叠l三i刎；年易月篝酽河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等

2、内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：毒黄眄铆弛荔p仲年6月弓日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文大鼠肾缺血再灌注损伤模型中PrxV和CAT的表达变化前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15

3、附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26综述肾缺血再灌注损伤及I-10．1的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯,1-1个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42中文摘要大鼠肾缺血再灌注损伤模型中PrxV和CAT的表达变化摘要肾缺血

4、再灌注损伤(Renalischemiareperfusioninjury,Ⅺ耐)是急性肾动脉阻断或肾脏移植等临床治疗过程中常见的病理生理过程。它也是导致肾移植后功能恢复延迟或病人发生急性肾衰的的重要因素。当肾脏发生缺血再灌注时会产生大量的活性氧族(reac—tiveoxygenspecies，ROS)，使肾脏处于高度氧化应激状态，这也是缺血再灌注损伤的重要机制之一。ROS的重要成员之一为H202，它可以通过破坏细胞内的蛋白质、DNA和脂类等生物大分子来影响细胞功能，进而引起细胞和组织死亡。Peroxiredoxin(Prx)蛋白是近几年发现的一类过氧

5、化物酶系，研究表明，它们具有清除ROS的作用。PrxV是其成员之一，它几乎在所有组织中均有表达，其中肾脏表达最高。线粒体和过氧化物酶体是细胞产生H202的两个主要部位，而PrxV在这两个部位均大量表达，因此推测：PrxV在清除H202中可能发挥了重要作用。过氧化氢酶(Catalases，CAT)主要存在于过氧化物酶体内，负责清除脂类代谢过程中产生的H20：。当肾脏发生缺血再灌注损伤并处于高度氧化应激状态时，PrxV和CAT的mRNA水平如何改变，尚未见报道。本研究通过采用无损伤动脉夹钳夹肾动脉法建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型，然后观察肾内PⅨV和CAT

6、的mRNA水平变化，探讨其在清除H202中的作用，为肾缺血再灌注损伤的防治提供一条新思路目的：观察PrxV和CAT在大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型肾内的mRNA表达变化，探讨其在肾内抗氧化应激反应中的作用。方法：1肾脏缺血再灌注损伤模型的制备及取材雄性Wister大鼠12只，体重200+10g，购于河北医科大学实验动物中心，随机分为对照组(Contr01)和肾脏缺血再灌注损伤组(PalPal)每组各6只。用6％水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(5ml／kg)，参照余晓东等人中文摘要的方法制备肾脏缺血再灌注损伤模型。ⅪⅪ组大鼠开腹后暴露其双侧肾脏，先切除右肾，然后

7、钝性分离左肾动脉，在靠近肾门处用无创动脉夹夹闭左肾动脉，观察肾脏由鲜红色逐渐变为暗红色。45rains后松开动脉夹，恢复血液供应，肉眼可见肾动脉充盈，肾脏由暗红色迅速变为鲜红色，表明再灌注成功。对照组大鼠开腹后只切除右肾，分离左肾动脉，但不夹闭左肾动脉。24小时后收集血液，3000rpm离心10min，分离血清用于血清肌酐(SerumCreatinine，SCr)、血尿素氮(BloodUreaNitrogen，BUN)浓度测定；处死大鼠取肾，一部分置于液氮中用于CAT和Pn(V的mRNA水平测定，一部分4％多聚甲醛中固定进行HE染色，观察肾组织形态学

8、改变。2测定指标及方法2．1HE染色观察大鼠肾脏的形态结构肾组织经常规脱水、透明，石蜡包埋后，切片厚约5p．