氧糖剥夺再灌注后小鼠n2a细胞高尔基体α-甘露糖苷酶ⅱ表达变化的研究

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1、中图分类号UDC硕士学位论文学校代码密级氧糖剥夺再灌注后小鼠N2a细胞高尔基体仅．甘露糖苷酶II表达变化的研究TheexpressionofGolgi伐一mannosidaseIIinmouseN2acellsuponoxygen—·glucosedeprivation／reperfusionInsult作者姓名：周妮娜学科专业：临床医学研究方向：神经病学学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：胡治平教授中南大学二。一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或

2、撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：吼丝年』月挈日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：导师签名日期：丛噬月牛日堡主堂垡笙銮一一中文摘要——————

3、———————————————————————————————一一．：2：!兰氧糖剥夺再灌注后小鼠N2a细胞高尔基体仅．甘露糖苷酶II表达变化的研究中文摘要目的：研究氧糖剥夺再灌注后小鼠神经瘤N2a细胞中高尔基体q．甘露糖苷酶II(MANII)的表达变化。方法：1．将小鼠神经瘤(N2a)细胞氧糖剥夺4小时后再分别在正常培养条件下培养6小时，12d',时及24小时，建立氧糖剥夺／再灌注的细胞模型。2．N2a细胞分为正常对照组、0GD4小时组、OGD4小时／R6小时组、OGD4dx时／R12dx时组、OGD4t]、时／R24d,时组一共5个组。3．MTT法检测各组细胞的活力。4．免疫荧

4、光共聚焦方法观察MANII在细胞内的分布。5．Westernblot检测各组细胞MANII蛋白的表达变化。6．QRT-PCR检测各组细胞中凇NII基因的表达变化。结果：1．N2a细胞经氧糖剥夺后，MTT值较对照组明显下降(PO．05)。而在再灌注6d,时、12d',时中，MANII的蛋白表达仍然偏

5、低，与正常组相比，差异不具有统计学意义(P>O．05)。但在再灌注24d,时，MANII的蛋白表达明显下降，差异具有统计学意义(PO．05)。随着再灌注时间的延长，再灌注6小时、12d,时后，MANII的mRNA表达变化不明显，与正常组比较无显著性差异(P>O．05)。但在再灌注24d',时后，MANII的mRNA表达水平明显下降，与正常组比较，差异具有统计学意义(P

6、基因表达水平降低，提示缺血再灌注损伤导致高尔基体的糖基化功能受损。关键词：氧糖剥夺再灌注，高尔基体，高尔基体0【．甘露糖苷酶II硕士学位论文英文摘要TheexpressionofGolgi仅-mannosidaseIIinmouseN2acellsuponoxygen·。glucosedeprivation／reperfusmnInsult一●一-一AbstractObjective：ToinvestigatetheexpressionofGolgiQ—mannosidaseII(MANII)inthemouseN2acellsuponoxygen—glucosedeprivati

7、on／reperfusion(OGD／R)insult．Methods：1．Themouseneuroblastoma(N2a)cellsweretreatedwith6hours，12hoursand24hoursofreperfusionafter4hoursoxygen—glucosedeprivation．2．TheN2acellsweredividedinto5groups：normalcontrolgroup，OGD4group，OGD4／R6group，