氧糖剥夺再灌注后src激酶的变化及其可能机制的探讨

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1、万方数据中图分类号UDC硕士学位论文学校代码!Q三三三密级公珏氧糖剥夺再灌注后Src激酶的变化及其可能机制的探讨TheAlterationsofSrcKinaseAfterOxygen—91ucoseDepriVationFollowedByReper向sionandItsPossibleMechanisms作者姓名：徐志勇学科专业：临床医学研究方向：神经病学学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：胡治平教授论文答辩日期丝』#!!：彤答辩委员会主席垒垫．中南大学二0一四年五月万方数据中南大学硕士学位论文原刨性声明原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究

2、成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名锯垄复日期：址年羔月军日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众

3、提供信息服务。万方数据中南大学硕士学位论文中文摘要氧糖剥夺再灌注后Src激酶的变化及其可能机制的探讨目的：探讨缺血再灌注过程神经细胞内Src激酶的表达变化和活性改变，探讨其可能的机制和意义。方法：以小鼠神经瘤母细胞株N2a细胞为研究对象，给予氧糖剥夺再灌注干预，体外模拟缺血再灌注过程，采用MTT法检测细胞活性，应用免疫细胞化学方法观察Src激酶在细胞内定位及表达，应用QI玎PCR检测Src训[斟A的含量变化，同时采用W色stemblot方法检测Src总蛋白的表达及其不同位点Tyr527和Tyr416的磷酸化水平。结果：1．MTT结果提示，氧糖剥夺4小时后N2a细胞活性较同期正常组稍有减低

4、，但差异不具有统计学意义；再灌注早期，再灌注6小时组和再灌注12小时组的细胞活性较同期正常组降低，差异均具有统计学差异(P

5、刚A的表达出现减低，差异有统计学意义(P<0．05)。随着再灌注时间的延长，SrcmRNA的表达逐渐回升，其中再灌注24小时组SrcmRNA的表达明显上调，与正常组对比，差异具有统计学意义(P0．05)，再灌注24小时组Sm总蛋白的表达较正常组出现增多，其差异具有统计学意义(P

6、灌注12小时组和再灌注24小时组则出现了明显的表达下调，差异具有统计学意义(P<0．05)。同样与正常组比较，Tyr416位点发生磷酸化的Src蛋白则在氧糖剥夺4小时组的表达无明显变化，而在再灌注6小时组、12小时组和24小时组的表达均出现了上调，差异均具有统计学意义(P<0．05)。结论：1．缺血再灌注损伤引起Src激酶的表达上调；2．缺血再灌注损伤引起Src激酶的活化，与Tyr416位点磷酸化和Tyr527位点的去磷酸化均有关。关键词：氧糖剥夺再灌注；src激酶；磷酸化；去磷酸化万方数据中南大学硕士学位论文英文摘要AbstractTheAlterationsofSrcKinaseAf

7、terOxygen—glucoseDepriVationFollowedByReperfusionandItsPossibleObjective：MechanismsTbelucidatemealterationsofSrc“naseinmouseN2acellsuponoxygen。glucosedepriVationfIonowedbyreoxygen(0GD／R)．Methods：Wbemployed0GD／：Rmodelto