土木香内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株k562adr的作用及机制研究

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1、中图分类号密级土木香内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562／ADR的作用及机制研究EffectofAlantolactoneonchronicmyelogenousleukemiadrug—resistantK562／ADRCells计：学位论文：42页表格：3个插图：6幅杨春辉指导教师：孟秀香教授申请学位级别：硕士学位学科(专业)：临床检验诊断学培养单位：大连医科大学完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其

2、他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：刊雠签字H期：Ⅷi马年』晕月卫曰关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内

3、打“√”)：1．保密口，在～年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者签名：锄批日期：w噼晔月17日翩虢翟磅=焉兰心目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．7(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(四)讨论⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．26(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27三、文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30(一)综述正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42大连医科大学硕士学位论文土木香内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562／ADR的作用及机制研究硕士生姓名：

5、杨春辉指导教师：孟秀香教授专业名称：临床检验诊断学摘要目的：土木香(InulaheleniumL．)为菊科植物，为多年生草本植物，性温，味辛、苦。广泛的分布于欧洲、北美洲以及我国新疆等地区。其干燥根可供药用，具有健脾养胃、祛痰、利尿和驱虫等多种功效。目前已从土木香中分离得到土木香内酯(Alantolactone)、异土木香内酯(Isoalantolactone)、二氢土木香内酯(Dihydroalantolactone)以及二氢异土木香内酯(Dihydroisoalantolactone)等多种活性单体成分，这些成分具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、驱虫、镇痛和

6、降血糖等多种生物活性。本实验以人慢性粒细胞白血病细胞株K562及其耐药细胞株K562／ADR为研究对象，探讨土木香内酯抑制K562／ADR细胞生长及其可能的分子作用机制。方法：1．本实验选用bcr／Abl融合基因表达阳性的慢性粒细胞性白血病细胞株K562及其多药耐药细胞株K562／ADR作为研究对象。2．采用台盼蓝拒染试验、MTT比色法检测不同浓度土木香内酯在不同作用时间点对K562／ADR细胞的生长抑制情况。3．通过流式细胞仪运用AnnexinV．FITC及PI双染法检测不同浓度的土木香内酯作用后对K562／ADR细胞凋亡的诱导情况。4．应用流式细胞

7、术检测土木香内酯作用后K562／ADR细胞内阿霉素的含量从而反应其对药物泵出作用的影响。5．应用Westemblot方法检测药物干预后K562／ADR细胞凋亡相关蛋白的变化：包括Bcl．2、Bax、Cleaved—caspase-3、Cleaved—caspase．9、Cleaved．PARP、CytochromeC；同时检测其对Bcr／Abl和P．gP蛋白表达。结果：1．Westernblot结果显示K562与K562／ADR细胞Bcr／Abl及P．gP蛋白的表达水平存在着明显的差异(p

8、2／ADR细胞对阿霉素及伊马替尼显示了明显的耐药性p<0．05)。台盼蓝拒染法及MTT结果显示