shrna抑制高尔基体α-甘露糖苷酶ii基因的表达对胃癌细胞的侵袭力的影响及机制

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1、分类号：．基!堕：至．．一TII、r．密级：——重庆医科大学硕士学位论文论文题目作者姓名shRNA抑制高尔基体Q一甘露糖苷酶Ⅱ基因的表达对胃癌细胞的侵袭力的影响及机制张璐指导教师姓名(职称、单位名称)易永芬教授重庆医科大学病理教研室申请学位级别硕士学科、专业名称病理学与病理生里堂论文答辩年月2013年5月{渤卿必重庆医科大学‘研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使

2、用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均邑在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：互荪苫瓷日期：20l>．牛．}R学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或都分内容(保密内容除外)，并编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩

3、印或其他手段保存论文。保密论文在解密后适用本授权书。论文作者签名：指导教师签名：日期：声膨≯．-予鹋蟛耘占目录英汉缩略语名词对照～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5论文正文：shRNA抑制高尔基体m甘露糖苷酶II基因的表达对胃癌细胞的侵袭力的影响及机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．82结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯213讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32文献综!述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。36致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。42攻读硕士期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43重庆医辩大学硕士研究生学位论文

5、英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称or-CatAPBocDNADEPC0t—catenin中文全称Q一连接蛋白Ammoniumpersulfate过硫酸铵Baseoair碱基对EomplemenaryDNA互补脱氧核糖核酸Diethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜E—cadFBSGMIIPBSRT．PCRSDSE-cadherinE-上皮细胞钙粘蛋白Fetalbovineserum胎牛血清Golgialpha-mannosidaseIIm甘露糖苷酶IIPhosphatebufferedsaline磷酸盐缓

6、冲液ReverseTraneriotionPolymeraseChainReactionSodiumdodecylsulfate逆转录聚合酶链反应十二烷基硫酸钠shRNAShorthairpinRNA短发卡RNA重庆医科大学硕士研究生学位论文TBETBSTBSTTris一硼酸核酸电泳缓冲液Tris．bufferedsaline盐缓冲液1lisBufferedSalinewithTween20Westernblotmicrolitremtcrogram2吐温20／Tris盐缓冲液蛋白免疫印迹微升微克重庆医科大学硕士研究生学位论文shRNA抑制高尔基体Q一甘露糖苷酶Il

7、基因的表达对胃癌细胞的侵袭力的影响及机制摘要目的：初步研究分析，在中、低两种分化人胃癌细胞系中，高尔基体0L．甘露糖苷酶II(GMII)各自的差异表达，以探讨GMII在胃癌发生发展中的作用。方法：1．应用阳离子脂质体技术手法，将合成的GMII靶向基因pGPU6／GFP／Neo．GMII编号1406，分别同时转染至低分化胃癌细胞MGC．803和中分化胃癌细胞SGC．7901中，并借助荧光倒置显微镜观察荧光显示并计算转染率，最后经过G418筛选出稳定转染的细胞株。2．利用Western．blot和RT-PCR检测转染以后两株细胞中GMII和E．cadherin、0【