沉默胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶ⅱ(gmⅱ)对肿瘤血管生成的初步研究

《沉默胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶ⅱ(gmⅱ)对肿瘤血管生成的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、重庆医科大学硕士学位论文沉默胃癌高尔基体α--甘露糖苷酶Ⅱ（GMⅡ）对肿瘤血管生成的初步研究姓名：李釩申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：易永芬201205重庆医科大学硕士研究生学位论文沉默胃癌高尔基体伐．甘露糖苷酶lI(GMI1)对肿瘤血管生成的初步研究摘要目的：初步探讨胃癌BGC．823细胞中GMII对胃癌血管形成的影响及其可能机制。方法：1．检测胃癌组织和正常胃粘膜组织中GMII的表达和CD34标记的微血管密度(MVD)，分析GMII的表达和MVD之间的关系。2．采用脂质体介导法将GMII基因的真

2、核表达质粒转染入胃癌BGC．823细胞株，经G418筛选出稳定转染的细胞株。3．将胃癌BGC．823细胞与HUVEC共培养，利用RT-PCR、Westemblot，检测GMII沉默后的抑制效应以及BGC．823细胞中VEGF．A和HUVEC中VEGFR．2的表达情况。4．采取Transwell体外迁移实验方法检测GMII沉默后对共培养的HUVEC增殖，迁移的情况的影响。结果：1．1GMII蛋白分别在正常胃粘膜组织中的阳性表达率为43％(17／40)；在高分化胃癌组中的阳性表达率为60％(6／lO)；在中分化胃癌组中的阳

3、性表达率为59％(13／22)，在低分化胃癌组织中为96％(24／25)，低分化组中GMII蛋白的阳性表达率明显高于正常胃粘膜组织，差异有统计学意义(P<0．05)。1．2低分化胃癌组中MVD为(30．56士6．57)个／HP，高于正常胃粘膜组织中(23．32士7．24)个／HP，差别具有统计学意义(P

4、性检测：GMII沉默组共培养的HUVEC与空白对照和空载对照组的细胞相比，增殖能力明显受抑制，差别具有统计学意义(P

5、进而导致肿瘤血管生成减少，这可能与GMII基因抑制后胃癌组织中血管生成受到影响有关。关键词：GMII；VEGF．A；VEGFR．2；胃癌重庆医科大学硕士研究生学位论文EFFECTOFGMIIWER凰SILENCEDoNANGIoGENESISoFGASTRICCARCINoⅣ【AINVITRoABSTRACTobjective：ToinVestigatethee能ctofGM11weresilencedi11gast“ccancercenlinesandintheHUVECco-cuhure．T匆to6nditsmec

6、hanism．Methods：1．GMIIandCD34weredetectedbyimmunohistochemicaltechlliquein40casesofnonlalgas仃icmucosaalld57casesofgastriccancertissues．TheexpressionofGMIIandCD34markersofmicrovasculardens时(MVD)wereexamindeiIlthetow铲oups，toaJlalyzetherelationshipbet、Ⅳeentheexpress

7、ionGMIIandMVD．2．TheBGC-823cellswerebuildedthestableexpressionofGMIIgenethatfilteredbyG418．3．GastriccancercellsBGC-823cellsa11dHUVECco-culture．ByWestemblotandRT-PCRa11alysistoexa血netheproteinandmRNA1evelsexpressionofGMII、VEGF—Ai11gastriccancercellsandVEGFR-2inHUV

8、EC．4．MigrationofHUVECwereassessedby仃answeUrnjgrationassay．Thee妇FectofGM11weresilencedonHUVECmultiplicationwasanalyzedwithMTTResults：1．GMIIproteininnomlalgastricmucosa