氨基胍对rop视网膜神经细胞凋亡及inos表达的影响

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1、分类号:密级:学号:2010109166单位代码:10759石河子大学硕士学位论文氨基胍对ROP视网膜神经细胞凋亡及iNOS表达的影响学位申请人杜安杰指导教师任兵教授申请学位门类级别医学硕士学科、专业名称眼科学研究方向眼底病及眼肌学所在学院医学院中国·新疆·石河子2013年5月EffectsofaminoguanidineonretinalnervecellapoptosisandtheexpressionofiNOSintheROPADissertationSubmittedtoShihezi

2、UniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByDuAn-Jie(ophthalmology)DissertationSupervisor:Pro.RenBingMay,2013石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成

3、果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研究生签名:时间:年月日使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名:时间:年月日导师签名:时间:年月日目录中文摘要……………………………

4、………………………………………………Ⅰ英文摘要……………………………………………………………………………Ⅱ英文缩略词…………………………………………………………………………Ⅲ前言…………………………………………………………………………………1技术路线图…………………………………………………………………………3材料与方法…………………………………………………………………………4结果…………………………………………………………………………………10讨论………………………………………………………………

5、…………………16结论…………………………………………………………………………………21参考文献……………………………………………………………………………22附图…………………………………………………………………………………29综述…………………………………………………………………………………37致谢…………………………………………………………………………………46作者简介……………………………………………………………………………47论文发表………………………………………………………………………

6、……47论文评阅……………………………………………………………………………48氨基胍对ROP视网膜神经细胞凋亡及iNOS表达的影响摘要目的:研究氨基胍(aminoguanidine,AG)对高氧诱导的视网膜病变(OxygenInducedRetinopathy,OIR)小鼠视网膜神经细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制,为氨基胍治疗早产儿视网膜病变提供理论依据。方法:选取7日龄SPF级C57BL/6J小鼠80只(160只眼)随机分成正常组、高氧组、高氧生理盐水组、AG治疗组,每组20只。正常组一直

7、放于正常空气中饲养;高氧组、高氧生理盐水组、AG治疗组分别于氧浓度为75±2%的氧箱中饲养5天后取出再放于正常空气中饲养至第17天,建立OIR模型。AG治疗组于第7天开始腹腔注射AG(100mg/kg)一天一次直至第17天,高氧生理盐水组注射等量的生理盐水。四组小鼠分别于第14天和17天随机处死10只,取眼球做视网膜石蜡切片,HE染色观察视网膜神经细胞的形态学变化并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数;末端脱氧核糖核酸介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TerminalDeoxynucleot

8、idylTransferaseBiotin-dUTPNickEndLabeling,TUNEL)染色,观察神经细胞凋亡情况并计数凋亡细胞和计算凋亡指数;免疫组化染色观察诱导型一氧化氮合成酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达情况;同时制备电镜切片,用透射电镜观察视网膜神经细胞超微结构的改变。结果:凋亡细胞主要位于视网膜内核层和神经节细胞层,第14天明显多于第17天;TUNNEL染色阳性细胞数目高氧组明显多于正常组(P<0.05),AG治疗组明显少于高氧组和

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