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1、褪黑素对大鼠脊髓损伤后iNOS表达的影响作者：李东武永刚赵尔曼杨秀玲段力军【摘要】目的：探讨褪黑素对大鼠脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法：采用改良Allen′s撞击法制备脊髓损伤模型；成年SD大鼠110只随机分为假损伤组、损伤组和药物治疗组3组，其中损伤组和药物治疗组各50只，分5个时间点（8小时、24小时、72小时、7天、14天）处死；假损伤组10只，于手术后14天处死，采用HE染色和免疫组化检测脊髓损伤后脊髓组织中iNOS蛋白的表达。结果：与损伤组比较,药物治疗组大鼠损伤后脊髓组织iNOS表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：褪黑素可通过抑制iNO
2、S蛋白表达对大鼠脊髓损伤起保护作用。【关键词】脊髓损伤;褪黑素;诱生型一氧化氮合酶 AbstractObjective：ToinvestigatetheinfluenceofMelatoninontheinductionofinduciblenitricoxidesynthase(iNOS)expressioninspinalcorduponspinalcordinjury(SCI)inrats.Methods:SCImodelwasreproducedaccordingtoAllen′smethodwithmodification.OnehundredandtenadultSDratsw
3、ererandomlydividedintothreegroups:shaminjurygroup(n=10),thespinalcordinjuredgroup(n=50),andSCIwith11melatonintreatmentgroup(n=50).FortheSCIgroupswithorwithoutmelatonintreatment,ratswerekilledatdifferenttime(8h,24h,72h,7d,14d).Andratsofshaminjurygroupwerekilledat14dpostSCIoperation.HEstainingandImmu
4、nohistochemistrymethodwereemployedtodetectiNOSexpressioninspinalcord.Results:MelatonintreatmentsignificantlyreducestheinductionofiNOSexpressioninspinalcordofratssubjectedtoSCIoperation(P<0.05or0.01).Conclusion:Theresultsuggeststhatmelatoninmayexertprotectiveeffectonspinalcordinjurythroughinhibit
5、ingtheinductionofiNOSexpression. KeywordsSpinalcordinjury;Melatonin;Induciblenitricoxidesynthase(iNOS) 脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后的继发性损伤是一个复杂的病理过程,包括兴奋性氨基酸、氧化性代谢产物和致炎细胞因子等多种效应因子的释放，可导致脊髓组织不可逆损害，表现为不同程度的运动、感觉和自主神经功能障碍。一氧化氮(NO)作为在体内广泛存在并具有多重生物学效应的信号介质可能起很重要的作用，体内NO由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)生成
6、,NOS广泛存在于包括中枢神经系统在内的各系统中。NOS有3种亚型,其中诱生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)产生的11NO量大、持续时间长,通过直接引起过氧化损伤或作为信号介质介导其它炎症因子而起作用，表现出强的神经毒性。褪黑素(5-甲氧基-N-乙酰色胺,melatonin,MT)主要是由松果体分泌的激素,能直接清除自由基,减轻细胞的过氧化损害[1]。本试验通过观察大白鼠脊髓损伤后腹腔注射褪黑素对iNOS表达的影响，分析褪黑素在脊髓继发性损伤中的可能作用，为临床治疗继发性脊髓损伤提供理论及实验依据，也为进一步实验研究提供资料。 1材料与方
7、法 1.1主要仪器与试剂Olympus光学显微镜图像采集系统显微图像分析系统(日本)，褪黑素购自晶美北京分公司(瑞士Alexis公司生产)，兔抗大鼠iNOS多克隆抗体免疫组化试剂盒、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司提供。 1.2实验动物与分组健康成年SD大鼠110只,雌雄各半,体重250～330g。随机分为假损伤组、损伤组和药物治疗组3组。其中损伤组和药物治疗组各50只，分5个
