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《bmscs 移植对大鼠脊髓损伤后vegf 受体胎肝激酶1 表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·974·ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,August2008,Vol.22,No.8•干细胞与组织工程•BMSCs移植对大鼠脊髓损伤后VEGF受体胎肝激酶1表达的影响1112于德水吕刚王岩峰刘丽波【摘 要】目的研究BMSCs移植对大鼠脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后VEGF受体胎肝激酶1(fetalliverkinase1,Flk-1)基因和蛋白表达的影响,探讨BMSCs移植修复大鼠SCI的机制。 方法取4周龄雄性Wistar大鼠5只,体重100~120g,进行BMSCs分离及培养。取81只Wista
2、r雌性大鼠,体重220~250g,采用改良Allen's打击装置制备SCI模型,随机分为3组:假手术组(A组,n=21),仅咬除T8~10棘突和椎板;DMEM组(B组,n=30),SCI区周围注射DMEM;BMSCs组(C组,n=30),SCI区周围注射BMSCs。于移植术后1、3、5d,采用RT-PCR方法检测各组大鼠SCI区Flk-1基因表达的变化;于移植术后3、7、14d,免疫组织化学方法观察脊髓内Flk-1蛋白的表达。 结果原代培养的BMSCs细胞形态多样,随着传代次数的增加,细胞形态逐渐趋于均一,多为扁平形和长梭形。RT-PCR结果显示,在移植术后1、3、5d,C组Flk-1mRNA
3、表达水平与B组比较差异无统计学意义(P>0.05);但B、C组与A组比较,Flk-1mRNA表达于术后1d明显增加并达峰值(P<0.01),术后3d下降(P<0.01),至术后5d表达仍高于A组(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,移植术后3、7d,B组Flk-1蛋白表达较A组显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);术后14d,A、B组Flk-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);移植术后3d,B、C组Flk-1表达相似,差异无统计学意义(P>0.05),移植术后7、14d,C组Flk-1表达明显高于B组(P<0.01)。 结论SCI后BMSCs移植对Flk-1mRNA的表达无调节
4、作用,但上调Flk-1蛋白的表达,是修复SCI的机制之一。【关键词】脊髓损伤BMSCs移植胎肝激酶1VEGF受体中图分类号:R651.2Q786文献标志码:AEFFECTOFBMSCsTRANSPLANTATIONONVEGFRECEPTORFETALLIVERKINASE1AFTERSPINALCORD11121INJURYINRATS/YUDeshui,LVGang,WANGYanfeng,LIULibo.DepartmentofOrthopaedics,theFirstAffiliatedHospital,2LiaoningMedicalCollege,JinzhouLiaoning,1
5、21001,P.R.China;DepartmentofNeurobiology,CollegeofBasicMedicalSciences,ChinaMedicalUniversity.Correspondingauthor:LVGang,E-mail:ganglv_sy@163.com【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofBMSCstransplantationongeneandproteinexpressionofVEGFreceptorfetalliverkinase1(Flk-1)afterspinalcordinjury(SCI),andto
6、investigatethemechanismofrepairingtheSCIbyBMSCstransplantation.MethodsBMSCswereisolatedandculturedfromfive4-week-oldmaleWistarratsweighing100-120g.TheSCImodelwasmadebyusingthemodifiedAllen’simpactordevice.Eighty-oneadultfemaleWistarratsweighing220-250gwererandomlydividedinto3groups:sham-operatedgrou
7、p(groupA,n=21),inwhichspinousprocessandvertebralplateofthorax8-10spinalcordsegmentwereremoved;DMEMgroup(groupB,n=30),inwhichratsreceivedfourinjectionsofDMEMintheperi-lesionarea;andBMSCsgroup(groupC,n=