褪黑素对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响.doc

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1、褪黑素对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响【摘要】观察褪黑素(melatonin，MT)对大鼠脊髓损伤(spinalcordinjury，SCI)后脊髓组织细胞凋亡的影响，探讨其对脊髓损伤的保护作用。方法成年Wister大鼠66只，随机分为三组：Sham组(假手术组)、A组(单纯SCI组)及B组(MT治疗组)。Sham组仅切除椎板未损伤脊髓；A、B两组采用改良Allen法制成大鼠SCI模型，术后立即分别腹腔注射等体积无水乙醇、褪黑素(100mg/kg)；Sham组于术后48h、A和B组于术后8、24、48、72h和7d分别进行

2、神经功能评分和测定伤段脊髓组织凋亡细胞数。结果A组凋亡细胞百分率伤后24h开始升高，48h达到高峰，72h开始下降；B组凋亡细胞百分率伤后24h、48h及72h与A组相比明显减少，差异具有显著性(P＜0.05或P＜0.01)；B组神经功能比A组有明显提高(P＜0.05)。结论SCI后应用MT可以抑制脊髓组织神经细胞凋亡，从而对脊髓损伤起保护作用。【关键词】褪黑素脊髓损伤细胞凋亡EffectsofMelatoninonRatNeuronsApoptosisAfterSpinalCordInjuryAbstract：Object

3、iveToobservetheeffectofmelatonin(MT)onratneuralcellapoptosisafterexperimentalspinalcordinjury(SCI)inordertostudytheprotectiveeffectonSCI.MethodsSixtysixWisterratswererandomlydividedinto3groups：shamgroup(nospinalcordinjury)，groupA(SCIgroup)andgroupB(MTgroup).Shamgr

4、ouponlycutvertebralplatewithoutspinalcordinjury.TheSCImodelwasinducedusingthemodifiedAllentechniqueingroupAandB.TheratsweretreatedwithMT(100mg/kg)ingroupBandthedehydratedalcoholofequalvolumeingroupAafterSCI.Apoptosisandnervesfunctionweremeasuredat8h、24h、48h、72hand7

5、dfollowingSCIingroupAandB，whileShamgroupwasat48h.ResultsCellapoptosisratewasincreasedat24h，reachedtheirpeaksat48handdescended72hafterinjuryingroupA.TheapoptosisrateingroupBwassignificantlydecreasedascomparedwithgroupAatthreetimepoints(P＜0.05orP＜0.01)，andthefunction

6、alrecoverywasbetteringroupBthaningroupA.ConclusionMTcaninhabitratneuralcellapoptosisafterSCI.IthasprotectiveeffectonacuteSCI.Keywords：melatonin；spinalcordinjury；apoptosis本实验旨在观察褪黑素(melatonin，MT)对大鼠脊髓损伤(spinalcordinjury，SCI)后脊髓组织神经细胞凋亡的影响，探讨其对脊髓损伤的保护作用，现报道如下。31材料与方法

7、1.1动物分组健康成年Wister大鼠(苏州大学实验动物中心提供)66只，体重220～300g，雌雄不限，随机分为三组：假手术组(Sham组)6只，单纯SCI组(A组)及MT治疗组(B组)各30只。A、B两组又按SCI后不同时间点(8、24、48、72h和7d)各分为5个亚组，每个时间点6只。1.2模型制备与处理以10％水合氯醛(400mg/kg体重)腹腔注射麻醉。严格无菌操作下取正中切口，切除T8～10椎板，暴露硬膜囊并保持其完整。Sham组仅切除椎板暴露硬膜，未损伤脊髓；A、B两组按照改良Allen法制作中度脊髓损伤模型

8、。B组于SCI后30min内腹腔注射MT溶液(100mg/kg体重，购自晶美上海公司，瑞士Alexis公司生产)，按照褪黑素说明书要求，用无水乙醇对褪黑素进行稀释；A组于同一时间内给予等量无水乙醇。术后常规青霉素40万U肌肉注射，1次/d；人工排尿，2次/d。1.3检测指标及方法A和B组分