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1、NRG?1β对缺血再灌注损伤大鼠视网膜细胞凋亡及Bax表达影响：徐建森孟瑞华张杰王景【摘要】目的探讨神经调节蛋白?1β（NRG?1β）对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后的保护作用及对Bax表达的影响。方法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型。将33只ethodsAmodelofretinalischemiareperfusioninratade.Thirty?threeal(threerats),control(15rats)andexperimental(15rats).Aninjectionof5μLofNRG?1βintovitreouscavityoftheratsinexperi
2、mentalgroupediateddUTPnickendlabelingtoexaminetheapoptosisofretinalcells.TheexpressionofBaxmunohistochemically.ResultsApoptoticcellsmainlyappearedintheinnernuclearandtheganglioncelllayers,almostnopositiveexpressionbersofapoptoticcellsanderessionsofBaxinvarioustimepointsinexperimentalgroupic
3、alreperfusioninjury.TheinhibitionofBaxbyNRG?1βmaybeoneofthemechanismspreventingtheapoptosisofthiskindofretinalcellinjury.［KEYWORDS］Reperfusioninjury;Retina;Neuregulins;Bcl?2?associatedXprotein视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）是眼科临床上常见病理过程，也是目前缺血性眼病领域的研究热点，其实验动物模型的制备日臻成熟[1]，对缺血再灌注损伤机制的研究更全面，基因水平上的研究越来越完备，而最终针
4、对各个可能的损伤机制而采取的保护和治疗措施正逐渐为我们所关注。有研究表明,早期的视网膜缺血再灌注是有益的,经过一定时间,缺血的视网膜并未出现明显功能障碍,但在再灌注后却出现了明显的功能障碍甚至不可逆损伤[2]。本研究利用线栓法制作RIRI模型，玻璃体腔注射神经调节蛋白?1β（NRG?1β）观察视网膜缺血再灌注前后Bax表达的情况,以探讨NRG?1β及Bax在RIRI中的作用,为NRG?1β对RIRI的治疗提供理论依据。现将结果报告如下。1材料与方法1.1动物与分组成年orehouseSchoolofMedicine公司生产。1.3动物模型的制备及药物干预方法参照尹晓涛等[3]
5、的方法制备S1.5[4]软件对数据进行处理两样本均数比较采用t检验。2结果光学显微镜下观察，细胞胞核中出现棕黄色颗粒为TUNEL染色阳性凋亡细胞。凋亡细胞出现在视网膜内核层(INL)及神经节细胞层(GCL),而外核层(ONL)几乎无阳性表达。正常组未见凋亡细胞，对照组缺血再灌注1h后仅可见少量凋亡细胞,再灌注后6h凋亡现象逐渐明显，12h凋亡细胞数逐渐增多,并于24h达到高峰,48h开始下降。实验组再灌注各时间点视网膜神经节细胞凋亡数目较对照组均明显减少(t=2.57～6.25,P＜0.01)。见表１。正常大鼠视网膜Bax蛋白不表达，Bax蛋白在对照组缺血再灌注1h有极少量表
6、达，6h组表达略明显,主要位于GCL,在12h组表达增强，在24h组达高峰,以GCL、INL染色最为明显，在48h组Bax蛋白表达下降。实验组Bax蛋白在各时间点的表达较对照组均减少(t=3.84～11.97,P＜0.01)。见表２。表1两组缺血再灌注不同时间点同侧眼神经节细胞凋亡数目比较表2两组缺血再灌注不同时间点Bax蛋白表达比较3讨论视网膜作为神经组织,在缺血低氧环境中极易受损伤,同时，由于视网膜中央动脉是终末动脉,故极易发生缺血,并可迅速导致视网膜的严重损伤。所以，缺血性视网膜损伤在眼科疾病中很常见，原因包括视网膜血管阻塞性疾病、高眼压以及影响视网膜血流量的眼科手术等
7、。视网膜组织在缺血时已发生了功能受损,但恢复血流灌注后并不能使功能障碍减轻,反而加重了组织损伤，具体表现为许多缺血性眼病病人在血液再通后，视网膜损伤更严重，视功能进一步下降。由于能造成永久失明等严重后果,视网膜缺血再灌注损伤已经成为近年来引起广泛关注的眼科课题。在视网膜缺血再灌注损伤中，细胞凋亡是INL和GCL细胞死亡的主要方式。大鼠视网膜缺血再灌注后GCL损伤的主要机制可能与Bax的表达失衡有关。本实验通过线栓法制备大鼠视网膜RIRI模型，在模型制备后，通过对其视网膜形态学上的观察，我们认为该方法制备
