rhepo对高糖状态大鼠视网膜muller细胞凋亡及nf-κb表达的影响

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1、青岛大学硕士学位论文rhEPO对高糖状态大鼠视网膜Muller细胞凋亡及NF--κB表达的影响姓名:李明申请学位级别:硕士专业:眼科学指导教师:孟岩20120522rhEP0对高糖状态大鼠视网膜MuI

2、er细胞凋亡及NF-KB表达的影响摘要目的:观察体外培养大鼠视网膜Mullcr细胞在高糖条件下的凋亡情况及NF-rB的表达变化,研究rhEPO作用下上述指标的变化,探索rhEPO的对Mullcr细胞的保护作用及其可能机制。方法:提取大鼠视网膜神经细胞及胶质细胞进行混合培养,反复胰酶消化法提纯Muller细

3、胞,随机分为空白组,高糖组及不同浓度rhEPO干预组,培养48h后应用TUNEL法检测细胞凋亡情况,sP免疫细胞化学法测定NF.心蛋白的表达变化。结果:TUNEL法检测显示空白组见少量凋亡阳性细胞,高糖组阳性细胞明显增多(P<0.01),各rhEPO干预组同高糖组相比凋亡细胞明显减少(P<0.01),且呈一定程度剂量依赖性;SP法见NF-r。B在空白组仅有极少量表达,在高糖组呈弱阳性表达,而各rhEPO干预组较高糖组表达明显增强(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:高糖能够引发大鼠视网膜Muller细

4、胞发生凋亡,而rhEPO能呈剂量依赖地抑制高糖引发的凋亡,其可能是通过上调大鼠视网膜Muller细胞NF-r,B的表达来发挥保护作用。硕士研究生李明(眼科学)指导教师孟岩教授关键词:促红细胞生成素;高糖;凋亡;视网膜Muller细胞;NF-xBIlYlllllll2l/lllll0/llll/8/llll/7llllll9/lll//5llll//5/lllY2087955AbstractObjective:ToobservetheprotectiveeffectofRecombinanthumaner

5、ythropoietin(rhEPO)ontheapoptosisofculturedratsMullercellsinducedbyhighglucoseinvitroandthepossiblemechanism.Methods:MullerceUsweresepratedandpi:rifiedfTomtheretinasof3dSDratsandwererandomlydividedintocontrolgroup,highglucosegroupandtherhEPO-treatedgroup

6、诵伍differentconcentrations.After48hours,TheapoptosisofMullercellswasdetectedbyTUNEL.TheexpressionlevelsofNF-r,BproteinWasdetectedbysemi-quantitativeimmunocytochemistry.Results:Therewereonlyafewapoptoticcellsfoundincontrolgroup.Thenumberofapoptoticcellsint

7、herhEPO—treatedgroupsWassignificantlylowerthanthatinthehi曲glucosegroup口

8、gulatetheexpressionofNF-r。B(P<0.01).Conclusion:rhEPOtreatmentcaninhibittheapoptosisofMullercellsinducedbyhighglucose蠲uⅨanditsinhibitioneffectisrelatedtotherhEPOconcentration.Up-regulatingtheexpressionofNF-rBmaybeoneofthemechanisims.Postgraduatestudent:Li

9、Ming(Ophthamology)DirectedbyProf.MengYanKeywords:rhEPO;highglucose

10、apoptosis;Mullercells;NF-KB引言糖尿病视网膜病变(DiabeticRetinopathy,DR)是糖尿病常见同时也是非常严重的并发症,属致盲性眼病,对糖尿病患者的生活质量有重大危害。以往认为高血糖引发的视网膜微循环障碍是DR的主要损伤因素,近年来的研究发现,视网膜神经细胞及胶质细胞的

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