rhepo对宫内炎性暴露和高氧肺损伤新生大鼠细胞凋亡及pi-3k,akt表达的影响

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1、分类号R772.1学校代码10601密级公开编号Y1002072硕士学位论文rhEPO对宫内炎性暴露和高氧肺损伤新生大鼠细胞凋亡及PI-3K,AKT表达的影响学科专业:内科学研究方向:新生儿危重症研究生姓名:刘漫君学号:Y1002072学位类型科学学位导师姓名:张华教授二O一三年三月0独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得(注:如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的

2、同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息

3、研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:导师签字:签字日期:年月日签字日期:年月日1目录中文摘要……………………………………………………………………….ⅠABSTRACT……………………………………………………………………Ⅲ英汉缩略词对照表……………………………………………………………Ⅵ前言……………………………………………………………………………...11材料与方法………………………………………………………………...21.

4、1实验材料……………………………………………………………..21.2主要试剂……………………………………………………………..............31.3主要试剂的配制..............................................................................................31.4主要实验仪器……………………………………………………………….61.5实验方法……………………………………………………………………71.5.1建立动物模型及分组……………………………….........

5、.........................81.5.2LPS孕囊注射方法………………………………………………..............81.5.3高氧干预方法………………………………………………......................81.5.4rhEPO治疗方法…………………………………………….......................91.5.5灌注固定和取材…………………………..……......................................91.5.6肺组织石蜡切片的制作……………………………..............

6、...................91.5.7肺组织切片HE染色…………………………….....................................101.5.8采用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡……………………………............111.5.9肺组织PI-3K/Akt通路mRNA表达……………………………….......121.5.9.1肺组织总RNA提取过程……………………………….....................121.5.9.2提取的RNA浓度、纯度、完整性测定………………….....................142

7、1.5.9.3逆转录过程…………………………………………............................141.5.9.4PCR扩增步骤…………………………………….................................151.5.9.5PCR结果检测……………………………………………….................161.5.10采用蛋白印迹方法检测PI-3K/AKT通路蛋白质的表达.....................171.5.10.1肺组织总蛋白质的提取………………………….............................

8、...17

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