n-乙酰半胱氨酸对高氧致新生大鼠肺损伤中ros、p-jnk及细胞凋亡的影响

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1、分类号：密级：UDC：学号：416522712044南昌大学专业学位研究生学位论文N-乙酰半胱氨酸对高氧致新生大鼠肺损伤中ROS、p-JNK及细胞凋亡的影响EffectofN-acetylcysteineontheexpressionofROS,p-JNKandapoptosisinneonatalratlunginjuryinducedbyhighoxygen郑潇玥培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名、职称：陈晓教授专业学位种类：临床医学专业领域名称：儿科学论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：陈强评阅人：杨

2、玉唐文燕2015年6月I一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和

3、电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密

4、（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：1.参照Ozdemir[1]所建立的大鼠高氧肺损伤模型，观察高氧暴露后新生大鼠的肺组织病理变化情况。2.研究高氧致新生大鼠肺损伤肺组织中ROS、p-JNK蛋白的表达、细胞凋亡的情况及相互关系，探讨三者在高氧致新生大鼠肺损伤中的作用3.研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对高氧致新生大鼠肺损伤肺组织中ROS、p-JNK及细胞凋亡的影响，并初步探讨其可能的作用机制，为NAC成为早期防治新生儿高氧肺损伤的药物提供实验依据。方法：1.实验分组：将72只生后第3d的SD大鼠随机分为以下3

5、组（每组n=24）：空气+生理盐水组（空气组对照组）、高氧+生理盐水组（高氧暴露组）和高氧+N-乙酰半胱氨酸组（NAC干预组）。2.模型制作及药物干预：自制高氧氧箱，氧箱内持续通入100%氧气，将高氧暴露组和NAC干预组的新生大鼠置于高氧氧箱中，空气对照组置于同一室内的常压空气中。NAC组于实验第1d开始腹腔注射NAC150mg/kg，连续14d，空气对照组和高氧暴露组于相同时间点腹腔注射等容积的生理盐水。3.标本的采集与检测指标：分别在实验第3d，7d，14d从各组中取8只新生鼠断头处死，开胸取肺组织。将右侧肺组织置于少量的PBS

6、中，然后置于液氮中速冻，用Elisa法检测肺组织中ROS浓度；将左侧肺组织置于中性甲醛溶液中固定后石蜡包埋，用HE染色观察肺组织病理学变化，用免疫组化法检测p-JNK蛋白表达并计算累积光密度值（IOD），用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡并计算凋亡指数（AI）。结果：1.肺组织病理学改变：在光镜下观察，空气对照组肺组织结构正常。高氧暴露组3d可见肺泡间隔充血水肿，少量炎症细胞渗出。高氧暴露组7d可见肺泡间隔增宽，充血水肿加重，大量炎症细胞浸润，部分肺泡腔内可见渗出液，II摘要肺组织结构紊乱。高氧暴露组14d可见肺泡间隔充血水肿减轻，炎

7、症细胞减少，肺组织结构紊乱。NAC干预组各时间点较高氧暴露组肺泡间隔充血水肿减轻，炎症细胞减少，肺泡间隔厚度变薄，肺组织结构未见明显紊乱。2.肺组织中ROS浓度变化：高氧暴露组、NAC干预组各时间点的ROS浓度均高于空气对照组（P<0.01）；NAC干预组各时间点ROS浓度均低于高氧暴露组（P<0.01）。空气对照组中各时间点之间的ROS浓度比较无统计学意义（P>0.05）；高氧暴露组中3d的ROS浓度开始升高，7d达到高峰，14dROS浓度下降，各时间点两两比较差异均有显著统计学意义（P<0.01）；NAC干预组中3dROS浓度开

8、始升高，7d达到高峰，14dROS浓度下降，各时间点两两比较差异有显著统计学意义（P<0.01）。3.肺组织中p-JNK蛋白变化及分布：高氧暴露组、NAC干预组各时间点的p-JNK蛋白表达均高于空气对照组（P<0.01），肺泡上皮细胞