大鼠视神经切断后视网膜双极细胞上pkc—alpha和recoverin的表达变化

大鼠视神经切断后视网膜双极细胞上pkc—alpha和recoverin的表达变化

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时间:2019-03-03

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1、中南大学硕士学位论文大鼠视神经切断后视网膜双极细胞上PKC—alpha和recoverin的表达变化姓名:蔡艳申请学位级别:硕士专业:神经生物学指导教师:罗学港20050501硕七学位论文摘耍大鼠视神经切断后视网膜双极细胞上PKC-alpha和recoverin的表达变化摘要众所周知,视神经损伤后存在顺行性溃变,然而近来研究表明除了顺行性变化外,在视觉神经系统中尚存在跨神经元的逆行性溃变。但视神经切断后视网膜双极细胞的改变尚未见报道。本实验用视神经切断模型检测了视神经切断后大鼠视网膜双极细胞的形态改变。实验动物随机分为正常组(5只)、假手术组(6只)及实验组(

2、30只)。实验组动物分别存活3、5、7、14、2l、28天后,用抗PKC—alpha抗体和抗recoverin抗体对视网膜进行免疫组织化学及免疫荧光检测。结果显示:①正常视网膜PKC—alpha阳性产物主要表达于内核层、内网层及节细胞层,在内网层内侧(即b亚层)可清晰的观察到双极细胞的轴突终扣,光镜下呈粗大颗粒状外观。②视神经切断后各时间点阳性双极细胞数量变化不明显,但内网层的轴突终扣损伤早期增高,术后14天达到峰值,2l天后开始减少。③正常视网膜recoverin在外核层、内核层、内网层及节细胞层均有表达。内网层的内侧及外侧部分(即b、a亚层)可见由阳性双极

3、细胞轴突终扣形成的两条平行带状结构。④视神经切断后recoverin阳性双极细胞逐渐减少;内网层轴突终扣损伤早期增高,14天达到峰值,2l天后减少并可见局部出现排列紊乱,甚至弥散在整个内网层中。视神经损伤后PKC—alpha和recoverin的表达变化结合我室以前的研究发现,提示视网膜内网层双极细胞、节细胞及无长突细胞之间的突触经历了结构与功能上的重塑过程。关键词:视神经切断,PKC—alpha,recoverin,轴突终扣硕士学位论文摘要ChangesofexpressionofPKC-alphaandrecoverinintheretinalbipola

4、rcellsofadultratsaftertheopticnervetranseetedABSTRACTItiswellknownthatthereexistsantegradedegenerationafteropticnerveinjtu'y.[-towever,recentstudieshavedemonstratedthatinvisualnervesystem,inadditiontoantegradedegenerationtherealsoexiststrans-nearaldegeneration.Buttoourknowledgethein

5、formationaboutofretinalbipolarcellsisnotavailableuntillnow,Inthisstudywetestedthehypothesisthatretinalbipolarcellsareundergoingchangesafteropticnervetransection.FortyoneadultSDratswererandomlydividedinto3groups:normalcontrol(n=5),shamoperation(n26)andexperimentalgroup(opticnervetran

6、sected,n=30).Theanimalswereallowedtosurvivefor3,5,7,14,21and28days.thensacrifiedrespectively.nleretinaeswereremovedanddetectedbyimmunohistochemistryandimmunofluorescenceusingspecificantibodiesagainstPKC-alphaandrecoverin.Wefoundthat①InnormalretinaPKC·alphapositiveproductsweremainlyl

7、ocalizedintheinnernuclearlayer(INL),innerplexiformlayer(IPL)andganglioncelllayer(GCL),especiallyintheIPL,Axonsandexpandedterminalsofbipolarcellswereclearlyshown.②Comparedwiththenormalcontrol,thenumberofpositiveterminalbuttonsintheIPLwasgraduallyincreasedfrom3days,7daysto14days,follo

8、wedbyadecreaseatthe

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