cx3536在鲫鱼视网膜水平细胞和双极细胞上的表达

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1、复旦大学硕士学位论文Cx35/36在鲫鱼视网膜水平细胞和双极细胞上的表达姓名:刘聪蓉申请学位级别:硕士专业:神经生物学指导教师:钟咏梅;杨雄里20081005一、中文摘要缝隙连接蛋白connexin35/36在鲫鱼视网膜水平细胞和ON型视锥双极细胞中的表达经缝隙连接的信号传递是神经元间通讯的一种主要方式。在视网膜中的神经元间存在经缝隙连接介导的广泛的电耦联,其在视网膜的信息加工、处理中起着重要作用。越来越多的实验证明,视网膜中组成缝隙连接的连接蛋白(Connexin,Cx)的表达可能因物种和细胞类型而异。本工作运用免疫荧光双标及共

2、聚焦激光扫描显微技术研究了连接蛋白Cx35/36在鲫鱼视网膜中的表达。结果显示,很强的Cx35/36免疫阳性反应产物呈圆型或椭圆型颗粒状分布于外网状层(outerplexiformlayer,OPL)和内网状)丢(innerplexiformlayer,IPL)。在垂直切片上,荧光双标结果显示,Cx35/36的颗粒状阳性反应物紧贴于recoverin标记的视锥细胞的轴突终末下方,但并不在其上。另外,大部分PKCa强阳性的视杆主导的ON型双极细胞(rod.ONbipolarcell,rod—ONBC)的树突也不被Cx35/36双标。

3、在分离细胞标本上,Cx35/36清晰地表达在PKCa弱阳性的视锥主导的ON型双极细胞(cone.ONbipolarcell,cone.ONBC)的树突上,但并不表达于大多数rod—ONBC上。此外,Cx35/36在GAD65/67阳性标记的分离的水平细胞(horizontalcell,HC)的树突上也观察到,包括接收视锥信号的Hl和H2型HC,但在接收视杆信号的H4型HC的树突上未见表达。Cx35/36表达于接收视锥主导的HC和cone.ONBC的树突上,提示Cx35/36可能与外层视网膜中视锥信号传导通路(conepathway

4、)的调节作用密切相关。4关键词:Cx35/36,免疫荧光双标,水平细胞,双极细胞,视网膜中图分类号:Q42—一、英文摘要ExpressionofCx35/36inhorizontalandcone-ONbipolarcellsofthecarpretinaABSTRACTSignaltransmissionthroughgapjunctionsisoneofmajorcommunicationwaysbetweenneurons.Ithasbeenwellestablishedthatretinalneuronsareextens

5、ivelycoupledthroughgapjunctionsandelectricalcouplingofthesecellsplaysallimportantroleinretinalinformationprocessing.Accumulatingevidencedemonstratesthatexpressionoftheconnexins(Cxs)composinggapjunctionsmaybespeciesdependentandcelltypedependentinretinas.Inthepresentwor

6、k,theexpressionofCx35/36incarpretinawasstudiedbyusingimmunoflurescencelabellingandconfocallaserscanningmicroscopy.StrongCx35/36-immunoreactivityWasobservedinboththeouterandinnerplexiformlayers(OPLandIPL),aspunctatelabelingpatterns.Doublelabellingexperimentsonverticalr

7、etinalsectionsshowedthatCx35/36punctawerelocalizedbeneathconepedicles,stainedbyrecoverin,butnotonthem.Inaddition,mostofthedendritesofrod-dominantONtypebipolarcellsstainedbyPKCawerenotlabelledwithCx35/36intheretinalsections.Inisolatedcellpreparations,Cx35/36Wasclearlye

8、xpressedonthedendritesofcone-dominantbipolarcells,butalmostnotonthoseofrod—dominantbipolarcells.Moreover,Cx35/36punctawerefo

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