n-甲基-d-天冬氨酸受体和甘氨酸受体介导的对视网膜水平细胞和双极细胞活动的调制

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1、”1822{3五後旦大学博1学位论文学校代码：l啦新学呼：∞102jOnN一甲基一D一天冬氨酸受体和甘氨酸受体介导的对视网膜水平细胞和双极细胞活动的调制院系：专业：纠．名：指导教师：完成日期：生命科学学院神经生物学沈吟杨雄里教授21)(J6年7月二O日缩略语及符号AMP．Aa-锄ino-3一hydm，叮一5-甜氨基-3．羟基．5-methyl4isoxazolepmpionic∞id甲基4异唑丙酸【Ca2+】linn戤11ularcalciumooncenn‘ati∞胞内钙浓度ACamacrineceU无长突细胞CBCcone-dominantbipol甜cell视锥主导的

2、双极细胞CHCo∞e．drivenhorizontaIceIl视锥驱动的水平细胞D．AP5D·2伽ino．5-phosphonopeTltanoateD．0【．氨基磷酸基戊酸DCKA5，7-dichlorok”u佗nic5，7．二氯犬尿烯酸DMSodimethyl鲫lfoxide二甲基亚砜concentrationatwhichhalFmaximalEC50半反应浓度rcsponseispmducedERGelec仃0retino掣狮视网膜电图GABAP锄inobutyricacid十氨基丁酸GCg卸glioncell神经节细胞Gluglutam疵谷氨酸HlccnHltyp

3、ehor胁ntalcenH1型水平细胞H4cenH4typehorizon协lccllH4型水平细胞N一【2一hydroxyethyl】piper配ine-N’HEPES-【2-ethme叫lfonic扯．d】hrhour小时HzHer乜赫兹INLinncrnuclearlayer内核层IPLinnerplexifo硼layer内网层LYLuci衙Y引low荧光黄MmoI／l摩尔每升mmminute分钟Mmol／L微摩尔每升撑Hillcoe衔cientHill系数nnumberofce¨s细胞例数nmnanOmeter纳米NMDAN-metjlyl·D·adpartateN

4、．甲基．m天冬氨酸NRlNMDA佗ceptorsubunit1NMDA受体1亚基oFF．ACoFFtype鲫staincdAC持续OFF型无长突细胞视锥信号主导的OFF—CBCcone．domin锄toFFbipolarcen0FF型双极细胞0N．ACONtype鲫stainedAC持续ON型无长突细胞0N．CBCcone．d锄．mantoNbipolarceU视锥信号主导的oN型双极细胞oNLOuternuclearlayer外核层视杆信号主导的oN．RBCrod-dominamoNbipolarcelloN型双极细胞OPL’outerplexifomlaycr外网层PB

5、SphosphatebufI研soIution磷酸盐缓冲液RBCrodbipol盯cen视杆主导的双极细胞Ssecond秒ftimeconstant时间常数摘要一、中文摘要N．甲基．D．天冬氨酸受体和甘氨酸受体介导的对视网膜水平细胞和双极细胞活动的调制1．卜甲基—D-天冬氨酸(N帕A)受体介导的对水平细胞和双极细胞活动调制谷氨酸是脊椎动物中主要的兴奋性神经递质。一般认为，视网膜水平细胞上仅存在谷氨酸受体o‘．氨基．3．羟基．5．甲基4异唑丙酸(A加PA)受体亚型，而NMDA受体在的视网膜水平细胞上并无功能性表达(除鲶鱼)。我们通过免疫组化的方法，在鲫鱼视网膜的视锥驱动的水平

6、细胞(H1细胞)上观察到NMDA受体亚基NRl的表达，而视杆驱动水平细胞(H4细胞)上并无表达。全细胞膜片钳实验表明，当NMDA和其共同激动剂(co—agonist)甘氨酸同时施加时，Hl细胞上可诱导内向电流，这一点电流能被NMDA受体的竞争性拮抗剂D-0【-氨基磷酸基戊酸(D“P5)完全压抑，也可为NMDA受体的甘氨酸位点的阻断剂5，7-二氯犬尿烯酸(DcKA)完全压抑。应用钙成像技术的研究迸一步表明，NMDA明显增加Hl细胞的细胞内钙浓度，且钙浓度的增大可被D．AP5压抑，但NMDA并不能增加H4细胞的胞内钙浓度。在分离灌流的视网膜标本上进行的细胞内记录实验表明，在含镁

7、的Ringer’s中，NMDA可降低H1细胞在撤光时所产生的超射(oFF_ovcrsh00t)反应，提示在生理状态下的NMDA受体可能参与了水平细胞的明暗变化时的功能调节。NMDA也参对视锥主导的双极细胞的感受野的调节。在分离灌流的鲫鱼视网膜上，我们用细胞内记录的方法观察到，NMDA压抑oN型视锥主导的双极细胞(0N．CBc)的中心对光反应，但增加了其感受野周围的超极化对光反应。NMDA对OFF型视锥主导的双极细胞(OFF￡Bc)的中心反应幅度没有影响，但减小其感受野周围的对光反应。双极细胞的周围反应可能来自于外网