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时间:2017-12-10
《hbdnf-gfp基因转染神经干细胞对视神经损伤大鼠视网膜bdnf表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、万方数据生堡急盗匡堂盘查至塑生!旦筮!§鲞筮墨塑鱼幽』她丛型:△螋塾至堂:巡:!墨:№:墨hBDNF—GFP基因转染神经干细胞对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响刘勇陈二涛冯东福潘栋超汪洋【摘要】目的探讨移植hBDNF-GFP基冈转染神经干细胞后对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响。方法①78只sD大鼠随机分为正常对照组(I/,=6)、视神经夹伤组(n=72)。视神经夹伤组动物行右侧视神经夹伤后随机平均分为三个亚组:分别于玻璃体腔内注射0.01mol/LPBS(PBS组),GFP基闲转染神经干细胞(GFP-NSCs组)和hBDNFoGFP基因转染神经干细胞(h
2、BDNF-GFP-NSCs组)。各组动物单纯暴露左侧视神经作为假损伤组。分别于移植后3d,7d,14d和28d处死动物取视网膜,ELISA法检测各组视网膜中BDNF含量。②另取6只视神经损伤大鼠移植hBDNF-GFP-NSCs,分别于2周、4周和8周各处死2只大鼠,取眼球做冰冻切片观察移植细胞存活、迁移情况。③35只sD大鼠随机分为4组:正常对照组(凡=5)、右眼视神经损伤NSCs治疗组(//,=10)、GFP-NSCs治疗组(凡=lO)及hBDNF-GFP-NSCs治疗组(n=10)。④各组于术后4周和8周分别处死5只大鼠,West.era-blot法检测视网膜组织
3、中BDNF表达。结果①ELISA结果显示,正常对照组BDNF含量与假损伤组间比较差异无统计学意义(P>0.05),移植手术后第3天时,三个损伤哑组视网膜匀浆上清中hBDNF含避明最增加(与假损伤组比较P<0.05),而i组间差异无统计学意义(P>0.05);7d时,GFP-NSCs组与假损伤组比较差异具有统计学意义(P<0.05),而PBS组、hBDNF-GFP-NSCs组与假损伤组比较差异尤统计学意义(P>0.05),PBS组与GFP-NSCs组I’日J及hBDNF-GFP-NSCs组与GFP-NSCs组问差异具有统计学意义(P<0.05);移植第14天和28天时,
4、PBS组和GFP-NSCs组中视网膜BDNF含量降低,而hBDNF-GFP-NSCs组中BDNF含量与其他三组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②冰冻切片示移植后,hBDNF-GFP-NSCs可在宿主视网膜内存活,并逐渐迁移至视网膜各层。③Western.blot检测显示,各组内第4周和第8周BDNF表达差异无统计学意义,移植hBDNF-GFP-NSCs组视网膜组织中BDNF表达明显高于于其他各组。结论hBDNF-GFP基因转染神经干细胞移植后可在宿主视网膜长期存活,且町以稳定高表达BDNF。【关键词】脑源性神经营养因子;干细胞;转染;视网膜Effect
5、sofhBDNF-GFPgene-transl;eetedmmralstemcelltransplantation帆BDNFexpressionintherl—矗laofratsfollowingopticllervecrushinjuryHUYong,CHENEr-tao。FENGDong-fu,PANDong-chao,WANGYang.Oel,om,,删ofNeurosurgery,TheThirdPeople’sHospitalandInstituteofTraumaticMedicine,SchoolofMedicine,鼢喇JiaotongUniversi
6、ty,Sh舭gh,a201900,ChinaCorrespondingauthor:FEMGDong-fu,Emaihfeng—elf@yahoo.coin【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofhumanRrain-derivedneurotrophicfactor-gammafetopro-tein(1aBDNF-GFP)gene-tranffectedneuralstemcell(NSC)transplantationOHBDNFexpressionsintheretinaofmrsafteropticnerve(
7、ON)crushinjury.Method①Seventy-eightSprague-Dawley(SD)Tatswererandomlyas—signedintoacontrolgroup(,l=6)andONcrushgroup(//,=72).IntheONcrushgroup,thefightONwascnrshedwhiletheleftNOwasexpo,H!asshaminjmy.RatsintheONcrushgroupweredividedinlothreesub-groups:PBSgroup(intravitreousinjec
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