rassf1a基因异常甲基化及microrna调控与膀胱癌复发的研究

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1、万方数据RASSFlA基因异常甲基化及MicroRNA调控与膀胱癌复发的研究目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(1)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(4)引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(8)正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(14)第一部分：膀胱癌术后复发危险因素分析材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(14)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(15)讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(17)第二部分：

2、人膀胱癌细胞中RASSFlA基因甲基化状态分析材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(20)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(29)讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(33)第三部分：转染miR一143和miR--29a对人膀胱癌细胞生长和侵袭能力的影响及其与RASSFlA基因甲基化的关系材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(36)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(39)讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(44)第四部分：不同复发频率膀

3、胱癌组织中RASSFlA基因甲基化状态和miR一143、miR--29a表达分析材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(46)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(50)讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(52)全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(54)全文参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(55)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(61)博士在读期间发表论文或综述、申请课题、获奖情况⋯⋯⋯⋯(70)致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯(71)万方数据RASSFIA基因异常甲基化及MicroRNA调控与膀胱癌复发的研究RASSFlA基因异常甲基化及MicroRNA调控与膀胱癌复发的研究摘要第一部分膀胱癌术后复发危险因素分析目的：分析我院膀胱癌行保留膀胱手术后复发的发生率及其危险因素。材料与方法：452例初发膀胱癌患者，于2003年1月"～2010年6月在我院行保留膀胱的手术治疗(膀胱部分切除或经尿道肿瘤切除)，术后病理证实为膀胱尿路上皮癌。所有患者随访2年，收集患者的一般资料(年龄、性别、吸烟史等)、肿瘤学特征(肿瘤数目、分期、分级)、术后治疗方案和术后复发的频度。按2年内复发的

5、频度分为无复发组、低复发组(2年内复发1次)和高复发组(2年内复发2次及以上)，比较各组临床病理特征的差异。对2年内有复发的低级别肿瘤患者按照复发后肿瘤分级是否改变分组，又分为无进展组(2年内肿瘤分级未增高)和进展组(2年内肿瘤分级增高)，比较2组临床病理特征的差异。结果：452例患者2年内肿瘤复发204例(45．1％)，其中127例为低复发组，77例为高复发组。而其余248例为无复发组。三组患者吸烟、肿瘤分级、肿瘤分期、肿瘤数目、接受规范膀胱灌注化疗和接受干扰素治疗的比例有非常显著性差异(P<0．001)；年龄、性别、术后全身化疗、放疗和BCG治疗比例无

6、显著性差异(P>O．05)。复发的低级别肿瘤共110例，其中无进展组79例，进展组31例。两组患者吸烟、肿瘤分期有非常显著性差异(P<0．001)；年龄、性别、肿瘤数目和术后是否规范的膀胱灌注化疗的比例无显著性差异(P>0．05)。结论：术前吸烟史、肿瘤分级、分期、肿瘤多发和未接受规范膀胱灌注化疗是膀胱癌患者术后复发的危险因素。而在术后随访中发现，初发肿瘤分期较高和术后继续吸烟的患者在复发时肿瘤分级增高的危险性增加。第二部分人膀胱癌细胞中RASSFlA基因甲基化状态分析目的：了解T24膀胱癌细胞株中RASSFlA基因甲基化状态及其与细胞增殖、侵袭能力的关系

7、。材料与方法：用浓度分别为0．1tamol／l、2．5umol／1和12．5pmol／1的DNA甲基化酶抑制剂5一杂氮脱氧胞苷(5-aza．dc)处理T24膀胱癌细胞株，分别为低剂万方数据RASSFlA基因异常甲基化及MicroRNA调控与膀胱癌复发的研究量组、中剂量组和高剂量组。然后各组用MTT法检测细胞生长抑制率，流式细胞检测细胞凋亡率和细胞周期改变，Transwell法检测细胞侵袭能力。RT--PCR法检测RASSFlA基因转录水平，Western--blot检测其蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP法)检测药物处理后RASSFlA基因甲基化状态

8、。结果：5-aza．dc低剂量、中剂量和高剂量组对T24膀胱癌细胞