沉默med19对人乳腺癌mcf-7细胞侵袭及迁移能力的影响

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1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：至P知挣一日期：!!兰：竺：!!苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报

2、中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名：导师签名：至堕丝El叁鸳日期：翌垒：!垒!?期：沉默Medl9对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭及迁移能力的影响中文摘要沉默Medl9对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭及迁移能力的影响中文摘要目的研究沉默Medl9对人乳腺癌MCF一7细胞侵袭及迁移能力的影响，探讨Medl9在乳腺癌

3、侵袭和转移方面的作用及作用机制。研究方法针对Medl9基因靶序列构建慢病毒表达载体，将慢病毒表达载体转染人乳腺癌MCF-7细胞株，RT-PCR和Westernblot检测Medl9基因的转录及蛋白表达水平；transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭及迁移能力；RT—PCR检测基质金属蛋白酶(MMP一9)和血管内皮生长因子(VEGF)基因转录水平的改变。结果将构建的siRNA-Medl9慢病毒表达载体成功转染入人乳腺癌MCF-7细胞：转染siRNA—Medl9慢病毒表达载体组(KD组)、空载体组(NC组)及空白组(CON组)MCF-7细胞Medl9mRNA表达量分别是0．076±0．033

4、、0．274±0．010、0．272±0．057，与NC组及CON组MCF一7细胞相比，KD组Medl9mRNA表达水平下降了72．3％、72．1％，KD组Medl9mRNA表达水平显著性降低(／KO．05)；KD组、NC组、CON组蛋白表达量分别为0．106±0．037、0．725±0．134、0．721±0．135，与NC组及CON组MCF一7细胞相比，KD组Medl9蛋白表达水平下降了85．4％、85．3％，KD组Medl9蛋白表达水平显著性降低(尺0．05)；KD组、NC组、CON组MCF一7细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数分别为23．8±4．32、43．4±3．65、45．8±5．81

5、，KD组细胞的侵袭能力显著性降低(P(O．05)；KD组、NC组、CON组MCF-7细胞在6h、12h、24h分别比较迁移的距离，KD组细胞随着时间的延长，迁移能力显著性下降(P

6、，KD组较NC组及CON组相I：匕VEGFmRNA表达量下降了36．77％、37．64％，KD组VEGFmRNA表达水平显著性降低(PO．05)；细胞侵袭和迁移能力无显著性差异(P>0．05)；l,64P一9和VEGF基因mRNA表达无显著性差异(P>O．05)。结论1、构建的siRNA—Medl9慢病毒表达载体转染入人乳腺癌MCF一7细胞后能显著降低细胞中Medl9的转录、蛋白表达水平。2、iedl9基因沉默降低细胞的侵袭及转移能力，从而抑制

7、乳腺癌的恶性生物学行为。3、Medl9基因沉默降低删P一9和VEGFmRNA的表达，从而抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。关键词Medl9基因；慢病毒：乳腺癌细胞；RNA干扰作者：王晓艳指导教师：李莉华ⅡInfluenceofsilencingMe璺!!竺婴!!笋tasisandinvasionofhumanbreastcancerMCF-7c』!——垒b—str—actofsilencingMedl9onmetastasis