沉默prss1对胃癌mgc803细胞迁移侵袭的影响

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1、分类号Ｒ３密级公开ＵＤＣ６１０学校代码１０巧５；硕壬学位论文：ｕ＇＊■ｖ一，－；（学术学位）．ｒ．；／沉默ＰＲＳＳｌ对胃癌ＭＧＣ８０３细胞迂移侵袭的影响驚齡等、－－－’－片與脚１研究生姓名：邓南星／心；：．指导教师、职称：张志伟副教授学科专业；基础医学研究方向；病理学与病理生理学所在学院；医学院二〇—五年五月戀？義孝义拿沉默ＰＲＳＳｌ对冒癌ＭＧＣ８０３细胞迂移侵袭的影响论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人：１宰美呑，教授，

2、硕导，南华大学评阅人２；屈顺林，副教授，硕导，南华大学答辩委员会主席；背律华，教授，博导，南华大学＿委员１；巧招阳，教授，硕导，南华乂学—＿２一委员：江青山医院，副教棵，硕导，南华大学附属第委员３；唐海林，副研巧员，硕导，中山大学肿癖防治中也委员４：蒂下．国，副教悟，硕导，南华大学答辩日期：２０１５年５月１６日南华大学学位论文原创性声巧本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特剧加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的

3、研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同王作的同志对本研究所作的贡献均已在论文。中作了明确的说明本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。扣－言＾曰作者签名：巧為Ｉ伴年１月南华大学学位论文版枚使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论义。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得ｙ■其它单位的名义发表、使用学位论文的规定，目Ｐ；学校。本人同意南华大学有关保留有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借腐；学校可封公布学位论文

4、的全部、或部分内容，可［＾＾采用复印缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本學位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文。，解密后适用该授权／２ＷＴ作者签名；評满Ｉ年ｒ月７＾曰导师签名：化年月日ｆ＾Ｉ＼沉默PRSS1对胃癌MGC803细胞迁移侵袭的影响摘要[目

5、的]通过沉默PRSS1基因的表达，观察对胃癌MGC803细胞迁移侵袭的影响，探讨PRSS1影响胃癌细胞增殖、迁移侵袭的分子机制。[方法]1.采用免疫组织化学染色结合组织芯片（含正常胃粘膜、癌旁、高分化、中分化、低分化胃腺癌及淋巴结转移癌组织）检测胃癌组织中PRSS1蛋白的表达,并分析其表达的意义。2.利用siRNA干扰技术，构建pcDNA6.2™-GW/EmGFP-miRi-PRSS1干扰质粒，将其转染MGC803细胞，经杀稻瘟菌素BlasticidinSHCl筛选，建立PRSS1稳定低表达的MGC803/miRi-PRSS1细胞系。利用RT-

6、PCR和Westernblot检测MGC803/miRi-PRSS1细胞中PRSS1mRNA和蛋白的表达。3.运用MTT法、平皿克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell迁移侵袭实验和流式细胞术检测PRSS1低表达对MGC803细胞增殖、细胞周期和迁移侵袭的影响。[结果]1.免疫组织化学染色结果显示：高分化、中分化、低分化胃腺癌组织及淋巴结转移癌组织中，PRSS1蛋白表达较正常胃粘膜组织、癌旁组织表达增加，且癌旁组织中的表达强于正常胃粘膜组织。2.构建pcDNA6.2™-GW/EmGFP-miRi-PRSS1干扰质粒，转染MGC803细胞,

7、筛选后建立PRSS1稳定低表达的MGC803/miRi-PRSS1细胞系。RT-PCR和Westernblot检测结果显示,干扰组MGC803/miRi-PRSS1细胞中PRSS1mRNA和蛋白表达量较空白组和载体对照组中mRNA和蛋白表达量均降低（P＜0.05）。3.PRSS1低表达对MGC803细胞增殖的影响：1）MTT结果显示，空白组MGC803I细胞的增殖率为0.814±0.003，干扰组MGC803/miRi-PRSS1细胞的增殖率为0.501±0.002，载体对照组MGC803/miRi细胞的增殖率为0.791±0.002。空白组M

8、GC803细胞增殖率明显高于干扰组MGC803/miRi-PRSS1细胞（P＜0.05）,表明PRSS1低表达后MGC803细胞的增殖活性降低（P＜0