gmⅱ沉默对胃癌细胞bgc-823侵袭性作用的影响

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1、重庆医科大学硕士学位论文GMⅡ沉默对胃癌细胞BGC--823侵袭性作用的影响姓名：朱嫦申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：易永芬201205重庆医科大学硕士研究生学位论文GMⅡ沉默对胃癌细胞BGC一823侵袭性作用的影响摘要目的：构建shIⅢA干扰质粒抑制GMII基因的表达，探讨其对胃癌侵袭能力的影响及其可能涉及到的分子机制。方法：将合成的靶向GMII基因的pGPu6／GFP／Neo．GMII．1406，应用阳离子脂质体法转染至胃癌细胞BGC．823，荧光倒置显微镜观察计算转染率，RT-PCR和W色stem-blot检测GMII基因和蛋白的表

2、达情况，应用RT-PCR，Westem-blot检测转染前后MMP．2、MMP．9IIRNA和蛋白表达变化，利用细胞划痕试验检测GMII被沉默后的细胞侵袭能力的变化，用Transwell侵袭小室法来测定GMII被沉默后侵袭能力的变化。结果：将重组质粒成功稳定转染入胃癌细胞BGC．823，平均转染率为70％；与对照组相比，转染重组质粒pGPU6／GFP／Neo．GMII．1406后的BGC．823细胞的GMII和MMP．2、MMP．9的rnJ酬A和蛋白表达呈下降趋势(P

3、6组与对照组相比，GMII被沉默后的胃癌细胞的侵袭能力降低(P

4、RATIONoFHUⅣ【ANGASTRICCANCERBGC一823CELLSObjectiVeTbobserVenlee仔bctsaIldmolecularmechamsmsofGMII—shRNAonthe血grationabil毋ofgas仃icc锄cercells．MemodsTosynthesistarget迦GMIIpGPU6／GFP／Neo．GMII-l406，Therecombinantplasmidw邪廿anS危ctedirltogastriccaIlcercellwithLipofactarI血e．WbuSedFluorescencern

5、jcroscopytosurveyandcalculatethe仃a11sfectione伍ciency；theGMIIexpressionofproteinandIIl：RNAwercmeasuredbyImPCRandWbstem_blotassay，cl啪gesofMMP-2锄dMMP-9expressiongene觚dproteinweresun，eyedwithRT-PCR锄dWestem-blot嬲say；WcalsouSedTranswellchamberassaya11dWb岫dclosureassaytOmeasurethealterati

6、onofgas仃iccancercells’sabil匆ofIIligration．ResultsReconlb血amexpressionplasmidw嬲stably仃．anS佗ctedi11toBGC-823celllines，t11eaVeragee伍ciencyof廿ans危ctionwas70％ingastriccallcercells．Incomp撕onwith觚ocon仃olgroups，GMII和MMP·2、MMP一9proteinandgemexpressionwerclowed；Cornpauredwiththecon仃ol铲oups，T

7、ranswellchamberassay锄dWoulldclosureassaymeasuredtheabili够ofIIligrationofGMIIsl瓜NA伊oupwaslower(P<0．05)．5重庆医科大学硕士研究生学位论文ConclusionTheGMIIsuppressionmayinKbitmigrationofgastriccancercellsbydowna由ustingtheMMP一2andMMP_9expressionKeywordsGMII；Short11a坤i11RNA；gastriccallcer；migration6重庆医科

8、大学硕士研究生学位论文英文缩写TriSAGEbpcD