抑制组织蛋白酶b表达对胃癌bgc-823细胞黏附,增殖和侵袭的影响

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1、抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、增殖和侵袭的影响王涛1，李敏2，臧文巧2，赵国强2#（1河南中医学院第一附属医院血液肿瘤科，河南，郑州，4500002郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室，河南，郑州，450052）通讯作者：赵国强Email:zhaogq@126.com   第一作者:王涛.硕士.主治医师.Tel:13603860857.Email:zangwenqiao@sina.com[摘要]目的：探讨抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、增殖和侵袭的影响。方法：构建针对CB的siRNA表达载体，脂质体

2、LipofectAmineTM2000转染胃癌细胞株BGC-823。荧光定量RT-PCR和免疫印迹检测CB在各组胃癌细胞中的表达水平；细胞黏附实验检测各组胃癌细胞的黏附能力；细胞侵袭性实验检测各组胃癌细胞的侵袭能力，细胞增殖实验检测各组胃癌细胞的增殖能力。结果：与空白对照组和无关siRNA对照组相比，沉默1组和沉默2组细胞中，CBmRNA的相对表达量显著降低（p<0.01）；CB蛋白表达被显著抑制；纤维黏连蛋白和基质胶黏附的胃癌细胞数目以及穿透基质胶的胃癌细胞数显著降低（p<0.05）；并且在2d、3d、4d、5d细胞孔内的吸光度值亦显著减

3、少，差异有显著性（P﹤0.05）。而在无关siRNA对照组和空白对照组之间，CBmRNA的相对表达量、两组的黏附细胞数目以及两组穿透基质胶的细胞数都无显著性差异（p>0.05）；结论：设计针对CB基因的siRNA片段构建的siRNA载体能够有效干扰胃癌BGC-823细胞中CBmRNA和蛋白的表达。抑制胃癌BGC-823细胞CB基因表达，可以降低胃癌细胞的生长速度、降低胃癌细胞与基质黏附能力、降低胃癌细胞侵袭和转移的能力。[关键词]:胃癌；组织蛋白酶B；增殖；侵袭；黏附[中图分类号]R735.1TheEffectofsiRNATargetGe

4、neCBontheadhesion、invasionandmetastasisCapabilitiesofgatriccancercellsBGC-823WANGTao1,,LIMin2,ZANGWenqiao2,ZHAOGuoqiang21DepartmentofHemato-tumor,TheFirstAffiliatedHospitalCollegeOfTCMofHenan,Zhengzhou450000,2DepartmentofMicrobiologyandImmunology,MedicalcollegeofBasicScien

5、ce,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052[Abstract]AIM:ToexploretheeffectofsiRNAtargetgeneCBontheadhesion、invasionandmetastasisCapabilitiesofgatriccancercellsBGC-823.METHODS:ConstructsiRNAexpressionvectorforCBusingmoleculecloneandLipofectAmineTM2000wasusedtotransfectBGC-823,a

6、kindofgastrictumorcellline.FluorescentquantitativePCRandwesternblotwereusedtotesttheexpressionofCBinBGC-823cells.Techniquesofcelladhesionexperiments,invasionassayandproliferationtestwereusedtoinvestigatetheadhesion,invasionandproliferationofBGC-823cellsrespectively.RESULTS

7、:BGC-823cellsinsilencinggroupsshowedlowerCBmRNAcomparedwithunrelatedsiRNAandblankcontrolgroups;ThenumberofBGC-823cellsadheringandpenetratingtoECMandfibronectindecreasedsignificantlyinsilencinggroup1and2comparedwithunrelatedsiRNAandblankcontrolgroups(p<0.01).Theabsorbancein

8、silencinggroup1and2decreasedsignificantlycomparedtothoseinunrelatedsiRNAandblankcontrolgr