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时间:2019-01-04
《sirt2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、SIRT2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响宋春丽,任吉华,冉龙宽,李宛蔚,陈娟(400016重庆,重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室)[摘要]目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silentinformationregulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法Westernblot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT2的表达,并通过Real-timePCR和Westernblot验证SIRT2基因的沉默效果。细胞迁移及侵袭实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞迁移和
2、侵袭能力的影响,Westernblot检测上皮细胞间充质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)指标蛋白(E-cadherin、α-catenin、α-SMA、N-cadherin)的表达。结果 SIRT2在多个肝癌细胞系中蛋白表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT2的表达水平。SIRT2基因沉默能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力,并使上皮属性蛋白E-cadherin、α-catenin表达水平升高,使间质属性蛋白α-SMA、N-cadherin表达水平降低。结论SIRT2基因沉默可以通过抑制肝癌细胞上皮细胞间充质转化从而抑
3、制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。[关键词]SIRT2;肝癌;迁移;侵袭[中图法分类号][文献标志码]AEffectofSIRT2onmigrationandinvasionofhepatocellularcarcinomacellsanditspreliminarymechanismSongChunli,RenJihua,RangLongkuan,LiWanyu,ChenJuan(KeyLaboratoryofMolecularBiologyonInfectionDiseasesofMinistryofEducation,ChongqingMedicalUniversity,Chongq
4、ing,400016,China)[Abstract]ObjectiveTostudythefunctionalroleoflentivirus-mediatedsilentinformationregulator2(SIRT2)onmigrationandinvasionofhepatocellularcarcinomacells(HCCs)anditspreliminarymechanism.MethodsTheexpressionofSIRT2intheHCCcelllinesandL02cells,animmortalizedhumanlivecellwasanalyzedb
5、yReal-timePCRandWesternblot.SIRT2expressionwastargetedbylentivirus-mediatedshRNAinterferencetechnologyandSIRT2proteinlevelwasmeasuredbyWesternblot.EffectofSIRT2onmigrationandinvasionofHCCswasdetectedbymigrationandinvasionassay.EMTproteinwasmeasuredbyWesternblot.ResultsSIRT2wasoverexpressedinthe
6、HCCcelllines,Lentivirus-mediatedshRNAsignificantlydown-regulatedtheSIRT2expressionlevelsinHCCs.KnockdownofSIRT2suppressedthemigrationandinvasionofHCCs.KnockdownofSIRT2inHCCcellsinducedtheproteinexpressionofepithelialmarkersE-cadherinandα-cateninthatwasaccompaniedbyaconcomitantreductionoftheprot
7、einexpressionofmesenchymalmarkersα-SMAandN-cadherin.ConclusionKnockdownofSIRT2inhibitedtheabilityofmigrationandinvasionofHCCspossiblythroughtheepithelial-mesenchymaltransition.[Keywords]SIRT2;hepatocellularcarcinoma;migration;inva
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