yb1表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响

《yb1表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、YB1表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响作者：杨靖许文林李娟弓晋灵吴晓君陈巧云王法春【摘要】　　目的：观察Y盒结合蛋白1（YB1）对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。方法：通过脂质体介导的方法将YB1shRNA重组载体转染入人类乳腺癌MCF7细胞，经G418筛选及克隆化培养后获得稳定转染株。运用RTPCR和蛋白质印迹方法检测MCF7细胞中YB1mRNA和YB1蛋白的表达水平，运用划痕实验和Transwell小室法检测细胞运动、迁移和侵袭能力的变化，同时运用RTPCR和蛋白质印迹方法检测细胞中MMP2的表达水平，并用明胶酶谱法检测MMP2蛋白的活性。结果：稳定

2、转染YB1shRNA的细胞中YB1的表达明显低于转染随机片段的细胞和未转染组细胞，且细胞的运动、迁移和侵袭能力以及MMP2的表达及活性也较后两组细胞明显下降。转染随机片段的细胞和未转染组细胞间无明显差异。结论:YB1shRNA可以沉默乳腺癌MCF7细胞中YB1的表达，并降低细胞的迁移和侵袭能力以及MMP2的表达及活性。【关键词】Y盒结合蛋白1;MCF7;shRNA;迁移和侵袭能力;MMP2　　［Abstract］Objective:TostudytheeffectsofYbox13bindingprotein1(YB1)ontheinvasiveness

3、andmigrationcapabilityofbreastcancercells.Methods：TherecombinanteukaryoticexpressionplasmidincludingYB1shRNAwasintroducedintoMCF7cellsbylipofectaminemediationandthecelllinewithstableexpressionofYB1wasobtainedbyG418screeningandcolonyculture.TheexpressionlevelsofYB1mRNAandproteinweredetermin

4、edbyRTPCRandWesternblotting.Themobility,invasivenessandmigrationcapabilityofcellswereevaluatedbyusingwoundhealingassayandTranswellchambermodelinvitrowhiletheexpressionlevelsofMMP2mRNAandproteinweredeterminedbyRTPCRandWesternblotting,andtheactivityofMMP2proteinwasdetectedbyGelatinZymography

5、.Results:TheexpressionofYB1inthecellstransfectedwithYB1shRNAwasmuchlessthanthecellstransfectedwithrandomfragmentandthecontrolgroup.Themobility,invasiveness,migrationcapabilityandtheexpressionofMMP2aswellastheactivityofMMP2proteinofthecellstransfectedwithYB1shRNAweremuchlowerthantheothertw

6、ogroupswhilethedifferencesbetweentheothertwogroupswerenotsignificant.Conclusion:TheinterferenceofYB1withYB1shRNAinbreastcancerMCF7cellscansuppresstheexpressionofYB1andtheinvasivenessandmigration13capabilityofcells，anddecreasetheexpressionofMMP2andtheactivityofMMP2protein.　［Keywords］Ybox

7、bindingprotein1;MCF7;shRNA;invasivenessandmigrationcapability;MMP2　　Y盒结合蛋白1（Yboxbindingprotein1，YB1）是Y盒蛋白家族成员之一，广泛分布于原核与真核生物，它参与多种生命活动过程，研究发现YB1与人类恶性肿瘤关系非常密切，在部分类型的肿瘤中表达量偏高，已证实YB1异常表达的肿瘤类型有前列腺癌、乳腺癌、肺癌等［1］，尤其在前列腺癌［2］和乳腺癌［3］中，YB