PRMT2对MCF-7细胞侵袭与迁移的影响及机制研究.pdf

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6、摘要：目的：明确蛋白精氨酸甲基转移酶2（proteinargininemethyltransferase2,PRMT2）对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭与迁移的影响，并初步探讨其可能的分子机制。方法：1.观察PRMT2稳定过表达后的人乳腺癌MCF-7细胞的形态学改变，Transwell体外侵袭及划痕损伤实验观察PRMT2过表达对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭及转移能力的影响。2.蛋白质免疫印迹（westernblot，WB）分别检测PRMT2稳定过表达及PRMT2稳定低表达的人乳腺癌MCF-7细胞中上皮组织间充质化（EM

7、T）相关蛋白的表达，细胞免疫荧光技术观察PRMT2过表达的人乳腺癌MCF-7细胞中表皮钙粘素（E-cadherin）胞内表达及定位改变；3.采用高通量抗体芯片技术对PRMT2过表达的人乳腺癌MCF-7细胞进行肿瘤信号通路关键位点蛋白检测，WB进行分子机制的初步研究。结果：1.形态学观测、Transwell体外侵袭及划痕损伤实验表示：PRMT2稳定过表达促进人乳腺癌细胞MCF-7出现EMT样形态学改变，促进MCF-7发生体外侵袭转移。2.WB检测结果表示：PRMT2稳定过表达减少E-cadherin的表达，增加Sl

8、ug的表达；而PRMT2稳定低表达则促进E-cadherin的表达，抑制Slug的表达；细胞免疫荧光结果显示：PRMT2稳定过表达后E-cadherin表达减少，但未见定位改变。3.抗体芯片检测结果提示：PRMT2降低β-catenin的磷酸化水平，WB检测结果表示，APC-Axin-GSK-3β复合物蛋白表达减少，Iβ-catenin核定位增加。结论：1.PRMT2增加