猪源乳酸菌抗感染益生特性的研究

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1、内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：丝!垄塑日内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产

2、权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：日期：摘要本试验对来自呼和浩特市30日龄仔猪肠道中分离得到的32株乳酸菌中随机选出两株乳酸菌分别命名

3、为LZi、LZ2，并对其进行细菌学、生化以及16SrRNA分子生物学鉴定。以及耐酸、耐胆盐的试验，并对其活菌体以及代谢物进行体外抑菌试验。以小白鼠为实验模型，以致病性大肠杆菌K88菌株作为指示菌，用ERIC·PCR方法检测乳酸菌LZl、LZ2体内抗感染试验，验证LZl、LZ2对指示菌的抑菌效果；用不同剂量的乳酸菌LZl、LZ2灌服小鼠，在不同时间分别用ELISA方法和流式细胞仪测定小白鼠血清中IL．2、IL-4、IFN—Y、n晒一Q的含量变化以及外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD28+T细胞

4、的生长规律。研究结果表明，分离的乳酸菌LZl、LZ2用传统的细菌学鉴定和分子生物学16SrRNA的鉴定相一致。乳酸茵活菌体没有抑菌活性，而其代谢产物都有较强的抑菌特性，但pH值影响抑菌活性较大，随着pH值的降低抑菌活性有升高的趋势，在弱酸或者中性环境下失去抑菌活性，胃蛋白酶和胰蛋白酶对代谢产物的影响不大。在体内抗感染的试验中发现在停止灌服菌液的第5d，能在小鼠的肠道内分离出所饲喂的乳酸菌并且不含有致病菌K88。LZl、LZ2低、中、高剂量组在第10，20，30天时血清中的IL一2含量极显著高于对照

5、组(正O．01)。LZl、LZ2低、中剂量组在第10，20，30天时血清中的IL-4含量高于对照组，但差异不显著(P>0．05)。LZl低、中剂量组在第10，20，30天时血清中的IFN吖含量极显著高于对照组p

6、l低、中、高剂量组在第10时CD3+T细胞含量极显著低于对照组(黔0．01)；LZ2中、高剂量组在第20，30天时CD3+T细胞含量极显著低于对照组p<0．01)。LZl中剂量组在第lO，20，30天时CD4+T细胞含量显著低于对照组p<0．05)；LZ2中、高剂量组在第10，30天时CD4+T细胞含量显著低于对照gH(p<0．05)。LZl低、高剂量组在第10天时CD8+T细胞含量显著低于对照组(p<0．05)；LZ2低、中、高剂量组在第10，20天时CD8+T细胞含量极显著低于对照组0<0．0

7、1)。LZl、LZ2低、中、高剂量组在第10天时CD28+T细胞含量极显著高于对照组(P<0．01)。关键词：乳酸菌；ERIC．PCR；ELISA；T细胞亚群ThestudyontheAnti—infectioneffectsofLife-profitableCharacteristicbyLacticAcidBacteriaSeparatedfromSwineAbstractTllistestrandomlyselected2strainsfrom32strainsoflacficacidbac

8、teriathatwereseparatedfromthe30day—agepigs,intestineandnamedthemasLZIandLZ2．ThenwedidtheidentificationoftraditionalBacteriology、Molecularbiologyand16SrRNA．ThenwetestedthethalliandmetabolismproductsoftheLABtodotheinvitrobacteriostasisfortheusua