猪源益生乳杆菌的分离、筛选及应用研究

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1、分类号S852.4学校代码10129UDC579学号2009201076猪源益生乳杆菌的分离、筛选及应用研究Isolation,Screening,andApplicationofaBeneficialLactobacillusfromSows申请人：侯成立学科门类：农学学科专业：预防兽医学研究方向：兽医微生物学与免疫学指导教师：周雨霞副教授季海峰研究员论文提交日期：二〇一二年五月摘要本研究采用益生菌分离筛选的常规方法，依据乳酸杆菌的判断标准，分离得到一株具有优良特性的约氏乳杆菌XS4，并在对其体外生长特性、发酵生产工艺进行研究的基础上，开展了母猪饲喂试验。取

2、得了如下结果：1、从健康母猪粪便中分离筛选出一株产酸、耐酸、耐胆盐能力强的菌株。经鉴定为约氏乳杆菌，命名为L.johnsoniiXS4。2、该株约氏乳杆菌最适生长温度为35℃，最适生长pH为6.0～7.5，最适碳氮源配比为2%蔗糖＋2%大豆蛋白胨＋2%牛肉膏＋0.75%酵母浸粉。该株约氏乳杆菌在pH2人工胃液中处理2h，存活率可达59.94%，处理4h，存活率可达46.22%；人工肠液对该菌无抑制作用；该菌在65℃处理60s，活性可保持70.9%，70℃处理60s，存活率仅为4.77%。该株约氏乳杆菌对猪源大肠杆菌、猪霍乱沙门菌和金黄色葡萄球菌均具有抑制作用。

3、在pH6.5的MRS培养基中，35℃培养48h，胞外多糖产量为309.39mg/L。3、采用响应面法对该株约氏乳杆菌冻干保护剂配比进行优化。结果发现脱脂乳、海藻糖、L-半胱氨酸对细菌存活率影响显著，其最优复配比例为：脱脂乳15.70g/100mL、海藻糖7.68g/100mL、L-半胱氨酸1.60g/100mL。优化后的保护剂冻干存活率为87.42%，与预测值87.26%非常接近。94、母猪饲喂试验表明，与对照组相比，添加6.0×10CFU/kg饲料约氏乳杆菌制剂使初生窝重、20d窝重、断奶窝重、窝断奶仔猪数分别提高了1.89kg（P＜0.05）、5.67kg

4、（P＜0.01）、7.04kg（P＜0.05）、0.88头（P＜0.05）；使粪中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量分别下降了54.67%（P＜0.01）、35.91%（P＜0.05）；使血清IgG含量提高了14.68%（P＜0.05），谷丙转氨酶含量降低了17.19%（P＜0.01）。由此可见，日粮中添加约氏乳杆菌对母猪生产繁殖性能有一定的改善作用。关键词：乳酸菌；分离；筛选；约氏乳杆菌；冻干；母猪Isolation,Screening,andApplicationofaBeneficialLactobacillusfromSowsAbstractUsingthe

5、generalisolationmethodsforprobioticsoneexcellentstrainL.johnsoniiXS4wasisolatedaccordingtothecriterionforLactobacillus.Thegrowthcharacteristics,fermentationtechnologysofL.johnsoniiXS4anditseffectsonproductionperformanceofsowshavebeenstudiedinthisexperiment.Theresultswereshowedasfoll

6、ows:1.Onestrainwassuccessfullyisolatedfromthefaecesofhealthysows,whichhadhighproducingacidability,acidresistance,andbilesalttolerance.ThisstrainwasidentifiedasL.johnsoniithoughstandardmorphological,biochemical,moleculartestsandnamedasL.johnsoniiXS4.2.Theoptimumgrowthtemperatureandgr

7、owthpHvalueofthisL.johnsoniiXS4was35℃and6.0~7.5,respectively.Theoptimumcarbonnitrogenmatchingofthisstrainwas2%sucrose+2%soypeptone+2%beefextract+0.75%yeastextract.Thesurvivalrateofthisstrainwasupto59.94%whenincubatedinartificialgastricjuiceatpH2for2h,andwas46.22%for4h.Artificialinte

8、stinaljuicehadinhib