猪源肠球菌的分离鉴定及其部分特性研究

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1、．＇Ｖ’．‘．＇．．．？．说，考《＾＾違硕±学位论文猪源肠球菌的分窝鉴定及真部分特性研究■．．研究生姓名王送林指导教师黎满香教授学科专化预防兽医学研究方向病原分子生物学与免疮学；．古．＇．Ｖ；．Ｖ．式．，＇’一．．二０．．．Ｖ；五年六月叫．．，Ｖ片片巧邊藤賺該議感兮霞－＾＞－：：？Ｉｎ：ｖＶｖ．＼ｙ．Ｘ分类号Ｓ８５密级公开ＵＤＣ１０５３７单位代码蝴南泰典乂＃硕ｉ学位论

2、文猪源肠球菌的分离鉴定及其部分特性硏究Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｏｆａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｎｐｏｒｃｉｎｅｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉｐ研究生姓名王送林指导教师黎满香教授学科专业预防兽医学研究方向病原分子生物学与免疫学论文答辩日期２０１５年５月３１日答＾员会由蒂余兴龙教授论文评阅人雷红宇王昌建范仲蠢二０—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导老师指导下进行的研究工作及取得，论文

3、中不包含的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育一机构的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：吏时间：兴咬年６月日７关于论文使用授权的说明目本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，Ｐ：学校有权、，可缩印保留送交论文的复印件和电子稿，允许论文被查阅和借阅Ｗ采用影印或扫描等复制手段保存、汇编学位论

4、文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究生教育。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：ｉ達布木时间；＞ｉｊｒ年（月日ｊ导师签名；时间：年＾月曰ク摘要为了解猪源肠球菌分离株的耐药特点及其毒力基因分布特征，为肠球菌感染疾病的治疗防控提供依据，此次研究从湖南省部分猪场的健康猪肠道内及患有流。行性腹泻的病猪肠道内分离肠球菌，并对分离菌株进行耐药性及毒

5、力基因检测一１．本实验共分离肠球菌１１５株，其中粪肠球菌１１株，巧肠球菌巧株，其他肠球菌４５株。有７２株肠球茜（包含３０株尿肠球菌，２株粪肠球茜，４０株其他肠球菌）分离自四个猪场的健康猪群肠道内；另外４３株肠球菌分离自流行性腹泻病猪肠道内，包括２９株尿肠球茜，９株粪肠球菌，５株其他肠球菌。２－．使用ＫＢ法检测１１５株肠球茜的耐药表型并通过ＰＣＲ方法检测其耐药基，因。结果显示：健康猪源脑球菌对寓浓度庆大霉素最敏感为９３．０６％其次为替考拉宁和氯霉素，敏感率分别为８１．９４％和６

6、５．２８％。流行性腹泻病猪中分离肠球＝菌对四环素、红霉素、头抱嗟吩这种抗生素完全不敏感，除糖狀类抗生素和氨节西林外，对其它几种药物的敏感率均低于健康猪源肠球菌的敏感率。分离的１１５株肠球菌多重耐药现象严重，有９８．３％的肠球菌对１４种抗生素呈Ｈ重或Ｈ重Ｌ：Ｊｌ上的耐药，比较分析湖南健康猪源与ＰＥＤＶ猪源肠球菌的多重耐药情况，发现ＰＥＤＶ猪源肠球菌比健康猪源的肠球菌呈更多重耐药的菌株数比健康猪源的肠球菌多，。所有的粪肠球菌为六重及六重＾上的耐药多重耐药最为严重。本次１对肠球

7、菌的耐药性进行检测发现，猪源肠球菌已对多种抗生素耐药，尤其是对四环素和红霉素，。各耐药基因的检出率分别为ｔｅｔＭ（６９几乎是全部耐药．６％）、＂｜｜〇〇－ＡａｃＶａ（ａｈ－Ｉ（、ａｎｔ６（６０〇）、ｅｒｍＢ（％２於．／〇、６ｐｈ２．６％）、ｐ３ＩＩ７０．４％）Ｉ／）（）（）（）（）ｍｅｆＡ（０．９％）、ＶａｎＢ（０．９％），ＶａｎＡ和ＶａｎＣ基因未检测到。通过耐药基因型与一耐药表型比较分析，发现肠球菌耐药表型与耐药基因并不完全致。３．５总共检出９采用ＰＣ民方法对

8、分离的Ｈ株肠球菌的毒力基因进行检测，ｌＦ０１４种毒力基因，分别是巧１Ａ、ａｃｅ、ｅｓ、ｈｌ、ａｓａ、ｅｆａＡ、ｅ旧、Ｅ５９、ＥＦ３３１。ｐｙｇ研究结果表明健康猪肠道内分离的７２株肠球菌也含有毒力因子，但其存在量较低，各基因的检出率低于１６％。四个猪场毒力基因的检出率有较大差异，猪场Ｃ，猪场Ｂ未检测到带有毒力基因的菌株的毒力基因检测率最高，这可能与养殖场的饲养管理相关或肠球菌的毒为基因在地域与地域之间存在差异。通过健康猪源肠球菌与流行性腹泻病猪分离