小鼠近视动物模型网膜pax6基因启动子cpg岛甲基化研究

《小鼠近视动物模型网膜pax6基因启动子cpg岛甲基化研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据论文题目：丛!鼠逗塑动物搓型塑圆腿￡丛鱼基固启麴王QQ岛甲基化研究答辩委员会主席：壑最狴蛐越鲻2一答辩委员会成员：庭蛊趱(萄盔重盘塞望．睦撞茎垫丝鳇趔垂越杰塑．．兰至型：缝整鳇型童塑查燮．万方数据温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯．．．．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．5第一部分Real．timePCR检测PAX6在小鼠实验性近视视网膜中的表达材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、．⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．14分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18第二部分近视动物模型C57BL／6小鼠视网膜PAX6基因启动子CpG岛甲基化状态材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯20结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．28分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．35结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．37参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．38附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46

3、参考文献．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯51英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯．．．．54学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55万方数据温州医科大学硕士学位论文小鼠近视动物模型视网膜PAX6基因启动子CpG岛甲基化研究中文摘要目的：1、研究C57BL／6d、鼠形觉剥夺性近视动物模型视网膜PAX6基因mRNA水平的变化：2、研究C57BL／6t]、鼠形觉剥夺性近视动物模型视网膜PAX6启动子区域CpG岛甲基化水平的变化。方法：1建立C57BL／6d、鼠形觉剥夺性近视动物模型：21日龄C

4、57BL／6d、鼠36只，随机分为4组，单眼形觉剥夺组：剥夺4周(n=12)，对侧眼作为自身对照；形觉剥夺恢复组(n=12)：单眼形觉剥夺4周，恢复7天：正常对照组(n：12)。实验前后分别用红外偏心验光仪测量小鼠眼球的屈光状态，光学相干断层扫描仪测量眼球生物学参数，包括眼前节、玻璃体腔深度和眼轴长度等。实验结束后用光学显微镜对各组的视网膜组织进行取材，分别提取视网膜组织基因组RNA和DNA，用于后续实验。2C57BL／6d、鼠形觉剥夺性近视视网膜PAX6mRNA水平的变化：取单眼形觉剥夺4周、单眼遮盖4周，恢

5、复7天以及年龄相匹配的正常对照组c57BL／6小鼠各6只。分离视网膜组织，实验眼、对侧眼、对照眼按随机数字表，分别提取视网膜总RNA，逆转录为cDNA，realtimePCR检测每组视网膜中PAX6的表达。在做检测前考虑到视网膜不同时间点表达的差异性，用正常小鼠(另5周龄C57BL／6小鼠25只)检测了不同时间点(8时、11时、14时、17时、20时五个时间点取材各5只小鼠)视网膜PAX6的表达情况，确定了统一的取材时间消除时间的干扰因素。3C57BL／6／J、鼠形觉剥夺性近视视网膜PAX6启动子区域CpG岛甲

6、基化水平的变化：万方数据温州医科大学硕士学位论文取单眼形觉剥夺4周、单眼遮盖4周，恢复7天以及年龄相匹配的正常对照组C57BL／B／J、鼠各6只。实验眼、对侧眼、对照眼按随机数字表，分别提取视网膜总DNA，亚硫酸盐修饰后用克隆测序的方法检测不同处理眼视网膜组织PAX6启动子区域Cp6岛甲基化状态。统计学处理采用SPSSl9．0统计学软件，组内实验眼对侧眼比较采用配对t检验，不同组间比较采用独立样本t检验。结果：1形觉剥夺4周后，同一小鼠的实验眼相比其对侧眼及对照组对照眼均向近视方向漂移且P<0，05。2形觉剥夺

7、4周，形觉剥夺眼和正常对照眼相比PAX6mRNA下降58％(P<0．05)，剥夺眼和对侧眼相比PAX8mRNA水平下降了52％(P

8、比PAXBmRNA表达明显下调。形觉剥夺恢复组实验眼PAX6mRNA表达恢复至正常水平。3C57BL／6小鼠近视模型，视网膜PAX6mRNA表达量的改变与该基因启动子区CpG岛的甲基化状态无明显相关性。【关键词】形觉剥夺

9、生近视；视网膜；PAX6；DNA甲基化；CpG岛2万方数据温州医科大学硕士学位论文TheresearchofretinaPAX6genepromoterCpGisla