脑缺血再灌注损伤后hif-1α对脉络丛细胞的修复作用

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1、中文摘要5统计学分析：使用SPSS15．0统计软件对实验数据进行统计学分析。组间计量资料比较采用t检验，以P<0．05表示差异有统计学意义。结果：1构建HIF．1acDNA，测序结果与Genebank记载完全一致(GenBankID：3091)，酶切鉴定后获得pcDNA3．1．HIF．1a质粒，克隆片段大小2．5kb。2大鼠神经功能缺失评分按ZeaLonga评分标准进行评分，MCAO模型建立2h后，选取再灌注6h，12h，24h，72h，7d时间点进行观察，实验组与对照组在死亡率上无明显差别，神经功能缺失评分上实验组与

2、对照组无明显差别。3在缺血再灌注早期(6h—24h)实验组与对照组在脑切片TTC染色梗塞面积无明显差别，再灌注72h以后可见实验组梗塞面积小于对照组。4HIF．1a对脑缺血再灌注损伤大鼠脉络丛组织(脏染色)形态学变化的影响：缺血再灌注6h后及12h后，脉络丛组织形态结构尚完整，上皮细胞排列整齐，无明显细胞水肿，细胞间隙大小基本正常，局部可见淋巴细胞浸润，此时治疗组与对照组脉络丛组织大致形态上无明显区别。脉络丛轮廓存在，大体结构完整，’局部可见上皮细胞间隙增宽。缺血再灌注24h后，神经组织病理性改变较前面时间点加重，脉络

3、丛结构松散，细胞间隙扩大，脉络丛上皮细胞高度水肿，部分细胞出现凋亡改变，血管内皮细胞肿胀，部分血管内皮断裂，脉络丛结构完整性破坏，此时间点观察到mF．10【质粒治疗组破坏程度轻于PBS对照组。缺血再灌注72h后，脉络丛上皮细胞凋亡减少，水肿程度未见减轻，与PBS对照组相比HIF．1a质粒治疗组细胞间隙没有进一步增宽，且内皮细胞破坏减少。缺血再灌注7d后，脉络丛组织结构恢复原有轮廓，上皮细胞肿胀程度减轻，部分区域可见纤维增生，为无细胞结构的纤维连接，此时间可以观察到与PBS对照组相比mF．1o【质粒治疗组上皮细胞恢复更完

4、整，血管内皮细胞轮廓更清晰，细胞间隙较之前紧凑。5HIF．1a对大鼠脑缺血再灌注损伤后脉络丛细胞超微结构的影响：PBS对照组与HIF．10【注射组在6h和12h均见内皮细胞水肿，细胞间紧密连接松解，核膜及各种细胞器损伤，少量吞饮小泡；治疗24h后两组间开始出现差异，HIF．1a注射组吞饮小泡数量增加较PBS组明显，且细胞间紧密连接松解相对较少；治疗72h后，HIF．1Q注射组细胞器及吞饮小泡数量2中文摘要明显多于PBS对照组，细胞器水肿现象明显缓解，细胞间紧密连接开始出现明显修复迹象，同HIF．1a注射组相比，PBS对

5、照组细胞间隙较宽，紧密连接恢复不明显，细胞间隙封闭和不如治疗组；治疗7d后，HIF．1a注射组细胞线粒体和粗面内质网等细胞器已恢复正常，整个内皮细胞处于恢复过程中，PBS对照组细胞器恢复不如HIF．1a注射组，尤其以分泌型细胞器如粗面内质网，高尔基体等最为明显，说明其分泌功能的恢复不如治疗组，此时间点HIF．1a注射组细胞间紧密连接已接近正常，而PBS对照组细胞间隙封闭仍不完全。结论：l大鼠脑缺血再灌注损伤后，经颈外．颈内动脉注射重组pcDNA3．1-HIF．1a质粒可减少脑组织的梗塞面积，具有神经保护作用。2大鼠脑缺

6、血再灌注损伤后早期给予外源-I生HIr：．1a基因治疗可以减轻脉络丛血管内皮细胞的损伤。3大鼠脑缺血再灌注损伤后，外源性HIF．1a可以有效修复脉络丛血管内皮细胞间的紧密连接。4大鼠脑缺血再灌注损伤后，外源性HIF．1a可以显著上调脉络丛神经分泌功能。关键词：脑缺血再灌注；缺氧诱导因子一la(HIF一1Q)；质粒转染；脉络丛；紧密连接；英文摘要TheEffectofHIF—latotheCellularRestorationofChoroidPlexusofRatswithCerebralIschemiaReperfu

7、sionInjury’一ABTRACTobjective：TheaimofthepresentstudywastotestthetreatmenteffectofmF．10【tothecellularstructurerestorationofchoroidPlexusofratswithcerebralischemiareperfusioninjurybasedontheresultsfromtheexperimentintroduced．Inthisexperiment，thevitrorecombinationt

8、echnologyofpcDNA3．1一ⅢF—lawasusedtoprepareHIF-laplasmid．WeinjectedthevitrorecombinedHIF—laplasmidintothemiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)reperfusedratsthroughextemal