大黄酸、大黄素诱导高糖状态下肾小球系膜细胞凋亡的比较性研究

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1、徐州医学院硕士学位论文大黄酸、大黄素诱导高糖状态下肾小球系膜细胞凋亡的比较性研究姓名：郭禹申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：印晓星；魏群利2012-03徐州医学院硕士学位论文大黄酸、大黄素诱导高糖状态下肾小球系膜细胞凋亡的比较性研究中文摘要目的探讨大黄酸、大黄素对高糖状态下SD大鼠肾小球系膜细胞(GlomemlarInesallgialcell，GMC)凋亡的影响。方法在高糖状态下建立肾小球系膜细胞增殖病理模型，MTT法检验；用不同浓度的大黄酸(20，40，80um01．L‘1)、大黄素(20，40，80¨m01．L‘1)分别刺激高糖状

2、态下GMC；HE染色(hematoxylin—eosinstajIling)观察细胞形态学变化；DAPI(4’，6．Diamidino．2．phenylind01e，dihydrocmoride)荧光染色观察细胞核凋亡情况；流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果1、系膜细胞增殖模型的研制25mmol／L的葡萄糖刺激24小时即显著地促进了系膜细胞增生，且这种作用在刺激48小时最为明显，说明系膜细胞增殖模型符合实验要求。2、实验结果2．1髓染色结果与正常组比较，大黄酸组24h20um01．L。1细胞碎片增多，凋亡细胞产生，细胞皱缩，胞膜完整，细胞核固化，

3、密度增大，染色质凝聚，嗜碱性增强，细胞核染成深蓝色；48h时细胞已皱缩成团细胞核碎裂成多个颗粒，胞膜不完整；40¨m01．L一、80“m01．L一，细胞严重皱缩成细长形，贴壁细胞数明显减少，胞核变小且密度增大，染色质凝聚，嗜碱性增强，染成深蓝色；48h时，视野内细胞数较24h减少更多，细胞皱缩成团，胞核破碎成多个颗粒，胞膜不完整。大黄素组24h20¨m01．L‘1细胞形态没有明显变化；40pm01．L‘1时凋亡细胞产生，细胞皱缩但胞膜完整，胞核固化，密度增大，染色质凝聚，嗜碱性增强，胞核染成深2徐州医学院硕士学位论文蓝色；80um01．L～，

4、细胞皱缩成团，细胞数减少，碎裂成颗粒的细胞核增多；48h40pm01．L。1时，细胞皱缩，细胞数减少，部分细胞核碎裂成颗粒，胞质浓染；80um01．L‘1时视野内已找不到完整细胞核。与大黄素组比较：24h、48h大黄酸低、中、高浓度细胞形态的改变较大黄素组明显。2．2DAPI染色结果与正常组比较：大黄酸组24h20pm01．L。时部分细胞核染色质出现浓缩状态，40“m01．L‘1时细胞核裂解为碎片，完整细胞核较少，80pm01．L。1时基本没有完整细胞核存在；48h20斗m01．L。1时部分细胞核裂解为碎片，40卜Inol·L。1时完整细胞核

5、较少，80“m01．L。1视野内很难找到完整细胞核。大黄素组24h20“m01．L。1时细胞核无明显变化，40pm01．L‘1完整细胞核减少，80¨m01．L。1产生凋亡小体：48h20“m01．L。1时，部分高度凝聚，未见细胞碎片，40pm01．L’1完整细胞核相对减少，20¨m01．L。1时镜下很难找到完整细胞核。与大黄素组比较：随着时间及剂量的增加，大黄酸低、中、高浓度组对细胞核的影响程度均强于大黄素各组。2．3凋亡率检测结果24h时，细胞早期凋亡率与正常组比较：大黄酸高浓度组有统计学意义，p<0．05。24h时，细胞晚期凋亡率和坏死细

6、胞率与正常组比较：大黄酸低、中、高浓度组均有统计学意义，p<0．05；大黄素高浓度组有统计学意义，p<0．05。24h时，细胞早期凋亡率组内比较：与高浓度组比较，大黄酸低、中浓度组、大黄素高浓度组有统计学意义，p<0．05。24h时，细胞晚期凋亡率和坏死细胞率组内比较：与低浓度组比较，大黄酸中、高浓度组、大黄素高浓度组有统计学意义，p<0．05；与中浓度组比较，大黄酸低、高浓度组均有统计学意义，p

7、素中浓度组有统计学意义，p<0．05。48h时，细胞晚期凋亡率和坏死细胞率与对照组比较：大黄酸低、高浓度组有统计学意义，p<0．05；大黄素高浓度组均有统计学意义，p<0．05。48h时，细胞晚期凋亡率和坏死细胞率组内比较：与低浓度比较，大黄酸高浓度组、大黄素高浓度组有统计学意义，p<0．05；与中浓度组比较，大黄酸、大黄素高度组均有统计学意义，p<0．05；与高浓度组比较，大黄酸低、中浓度组、大黄素低浓度组均有统计学意义，p<0．05。结论大黄酸、大黄素均有诱导高糖状态下SD大鼠肾小球系膜细胞凋亡的作用，且大黄酸优于大黄素，并呈剂量依赖性。

8、关键词。

9、

10、孚小球系膜细胞；大黄酸；大黄素；凋亡4徐州医学院硕士学位论文Comparedtheef．fectionbetweenRheinandArchenonap