高糖刺激肾小球系膜细胞bcl

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1、高糖刺激肾小球系膜细胞Bcl【摘要】　　目的:研究高糖刺激肾小球系膜细胞后，凋亡相关基因Bcl-2、Smac、Fas的表达情况。方法:将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组（糖浓度为5.6mmol/L）和高糖组（糖浓度为30mmol/L），采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同作用时间（12h、24h、36h、48h）下，系膜细胞的增殖状况，且在各时间点，采用免疫荧光染色法观察Bcl-2、Smac、Fas的表达情况并测定其荧光强度。结果：MTT比色法检测结果显示高糖组较对照组系膜细胞增殖

2、明显，与作用时间呈正相关。同时，免疫荧光检测结果显示高糖组Bcl-2在以上不同时间作用下，与对照组相比，荧光强度增强（P<0.05），且高糖组随作用时间的延长，强度也相应增强，24h、36h、48h各时间点的荧光强度与12h相比，差异有统计学意义（P<0.05）。而Smac、Fas的荧光强度与对照组相比则减弱（P<0.05），且随作用时间的延长，强度也逐渐减弱，24h、36h、48h各时间点与12h相比，差异有统计学意义（P<0.05）。Bcl-2的荧光强度与Smac或Fa

3、s的荧光强度之间存在明显的负相关关系（P<0.05）。Smac的荧光强度与Fas的荧光强度之间存在明显的正相关关系（P<0.05）。结论：高糖刺激系膜细胞后，细胞增殖明显，Bcl-2的表达增加，Smac、Fas的表达下降，呈时间依赖性。【关键词】肾小球系膜细胞高糖Bcl-2SmacFas　　[Abstract]Objective:Toinvestigatetheexpressionofapoptosisgeneassociatedac,Fasinglomerulimesaginal(M

4、cs)cellsunderhighconcentrationglucose.Methods:Mcscellsalconcentrationglucose,5.6mmol/L),highglucosegroup(mol/L).UsingMTTassay,theproliferationofMcsafter12h、24h、36h、48hinedrespectively.TheexpressionofBcl-2、Smac、FasinMcscellsicroscopeateachtimepointment

5、ionedaboveandthefluorescentintensityageanalysissystem.Results:TheproliferationofMcscellsunderhighconcentrationglucoseoreobvious,parede-dependentmanner.Atthesetimepoints,thefluorescentintensityofBcl-2inhighconcentrationglucoseac,Fase-dependentmanners.I

6、nMcscellsunderhighconcentrationglucose,theeffectsof24h,36h,48horeobviousthanthatof12h.ThecorrelationbetacorFasacandthefluorescentintensityofFasotetheproliferationofMcs.InMcscellsunderhighconcentrationglucose,theexpressionofBcl-2increases,acandFasdecre

7、ases,parederulimesaginalcell;Highconcentrationglucose;Bcl-2;Smac;Fas　　增生性肾小球肾炎的早期病变表现为球内细胞数量和（或）细胞外基质的异常增多，随着病变发展呈球内硬化，甚至全球硬化，并引起严重的肾功能障碍。肾小球细胞的异常增殖尤其是系膜细胞的异常增殖是肾小球炎症的基本病变，是导致细胞外基质异常堆积和肾小球硬化的一个共同途径。因而遏制球内细胞和基质的异常增多，是有效防治肾小球硬化的关键。以往研究多集中在增殖方面，随着凋亡研究的不断

8、深入，发现维持细胞数目稳定需要增殖与凋亡两者作用的平衡。细胞凋亡参与了肾脏正常发育和肾脏病发生等多个过程。细胞凋亡受多种因素调控，在自身免疫性疾病及其肾脏损害的发病过程中，凋亡相关基因Bcl-2、Fas备受关注，近年来对新发现的一种促凋亡基因Smac研究也逐渐升温。　　Smac通过诱导procaspase-3的活性及增加成熟Caspase-3的酶活性促进凋亡，这两种功能均依赖于IAPs与Smac的相互作用。目前国内对凋亡基因Bcl-2，Fas研究较多，Smac研究尚不多见，尤其是S