高糖刺激肾小球系膜细胞Bcl-2、Smac、Fas的表达研究.doc

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1、高糖刺激肾小球系膜细胞Bcl-2、Smac、Fas的表达研究【摘要】　　目的:研究高糖刺激肾小球系膜细胞后，凋亡相关基因Bcl-2、Smac、Fas的表达情况。方法:将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组（糖浓度为5.6mmol/L）和高糖组（糖浓度为30mmol/L），采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同作用时间（12h、24h、36h、48h）下，系膜细胞的增殖状况，且在各时间点，采用免疫荧光染色法观察Bcl-2、Smac、Fas的表达情况并测定其荧光强度。结果：MTT比色法检测

2、结果显示高糖组较对照组系膜细胞增殖明显，与作用时间呈正相关。同时，免疫荧光检测结果显示高糖组Bcl-2在以上不同时间作用下，与对照组相比，荧光强度增强（P<0.05），且高糖组随作用时间的延长，强度也相应增强，24h、36h、48h各时间点的荧光强度与12h相比，差异有统计学意义（P<0.05）。而Smac、Fas的荧光强度与对照组相比则减弱（P<0.05），且随作用时间的延长，强度也逐渐减弱，24h、36h、48h各时间点与12h相比，差异有统计学意义（P<0.05）。

3、Bcl-2的荧光强度与Smac或Fas的荧光强度之间存在明显的负相关关系（P<0.05）。Smac的荧光强度与Fas的荧光强度之间存在明显的正相关关系（P<0.05）。结论：高糖刺激系膜细胞后，细胞增殖明显，Bcl-2的表达增加，Smac、Fas的表达下降，呈时间依赖性。【关键词】肾小球系膜细胞高糖Bcl-2SmacFas　　[Abstract]Objective:ToinvestigatetheexpressionofapoptosisgeneassociatedwithBcl-2

4、,Smac,Fasinglomerulimesaginal(Mcs)cellsunderhighconcentrationglucose.Methods:Mcscellsweredividedintotwogroups:controlgroup(withnormalconcentrationglucose,5.6mmol/L),highglucosegroup(withhighconcentrationglucose,30mmol/L).UsingMTTassay,theproliferatio

5、nofMcsafter12h、24h、36h、48hwasexaminedrespectively.TheexpressionofBcl-2、Smac、FasinMcscellswasobservedbyfluorescencemicroscopeateachtimepointmentionedaboveandthefluorescentintensitywascalculatedbyimageanalysissystem.Results:TheproliferationofMcscellsun

6、derhighconcentrationglucosewasmoreobvious,comparedwithcontrols（P<0.05),andwasfoundinatime-dependentmanner.Atthesetimepoints,thefluorescentintensityofBcl-2inhighconcentrationglucosewasstrongerthancontrols（P<0.05).ButthefluorescentintensityofSmac

7、,Faswasweaker（P<0.05).Andtheeffectswereintime-dependentmanners.InMcscellsunderhighconcentrationglucose,theeffectsof24h,36h,48hweremoreobviousthanthatof12h.ThecorrelationbetweenthefluorescentintensityofBcl-2andthefluorescentintensityofSmacorFaswasn

8、egative（P<0.05)．ThecorrelationbetweenthefluorescentintensityofSmacandthe5fluorescentintensityofFaswaspositive（P<0.05).Conclusion:HighconcentrationglucosecanpromotetheproliferationofMcs.InMcscellsunderhighconcentrationglucose,theexpressionofBcl-