百合病毒的dna芯片检测技术研究3

《百合病毒的dna芯片检测技术研究3》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、3百合病毒的DNA芯片检测技术研究1,233133124王进忠,贾慧,文思远,王升启,张民照,赵祥云,董金皋(1.北京农学院植物科学技术系,北京102206;2.北京市农业应用新技术重点实验室;北京102206;3.军事医学科学院放射医学研究所;北京100850;4.河北农业大学生命科学学院,河北保定071001)DetectionforCMV,LSV,LMoVInfectedLilywithDNAMicroarryTechniques1,21331WANGJin2zhong,JIAHui,WENSi2yuan,WAN

2、GSheng2qi,ZHANGMin2zhao,24ZHAOXiang2yun,DONGJin2gao(1.DepartmentofPlantScienceandTechnology,BeijingAgriculturalCollege,Beijing102206,China;2BeijingKeyLaborato2ryofNewTechnologyinAgriculturalApplication,China;3.BeijingInstituteofRadiationMedicine,AcademyofMilitar

3、yMedicalScience,Beijing100850,China;4.CollegeofLifeSciences,AgricultureUniversityofHeBei,Baoding071001,China)Abstract:SpecificprimersandprobesweredesignedaccordingtoconservativeandspecificDNAsequenceofCMV,LSVandLMoV.Theprobeswerespottedonglassslidestoformmicroar

4、raysTheCy32labledsinglestrandDNAfragmentspreparedbydissymmeticalRT2PCRwerehybridizedwiththeprobesontheglassslides.Themicroarrayswerescannedandanalyzedwithascanner.DNAmicroarraycoulddetectdifferenttypedDNAofCMV,LSVandLMoVwithadequatespeci2ficityandsensitivity.Mic

5、roarraytechniquesestablisharapid,sensitiveandspecificdiagnosticas2sayforlilyviruses.ThesuccessfullydevelopedDNAmicroarrayandtechniquesmightbeaveryusefulmethodfordiagnosisandprevention,andwidelyappliedinspecificpathogendetectionofdiseasessuchaslilyvirus.Keywords:

6、Cucumbermosaicvirus(CMV);Lilysymptomlessvirus(LSV);Lilymottlevirus(LMoV);DNAmicroarry;Detection摘要:根据已知的黄瓜花叶病毒,百合无症病毒、百合斑驳病毒基因核苷酸序列,设计引物和探针,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记核苷酸引物,不对称RT2PCR扩增产物与芯片上的寡核苷酸探针杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。研究制备的基因芯片能够检测侵染百合的3种重要病毒核酸的特异性荧光信号,该项技术具有特异、灵敏、快速的优点。关键词:黄瓜花叶病

7、毒;百合无症病毒;百合斑驳病毒;基因芯片;检测中图分类号:Q939.46文献标识码:A文章编号:100325125(2005)0420429205百合(Lilium)是集观赏、食用、药用于一身的重用种球主要来源于荷兰进口和国内自繁,为防止百要经济作物,现已成为国际上重要切花观赏花卉之合病毒病随种球扩散与传播,就必须加强百合检疫[1]一。近年来,随着百合种植面积的迅速增加,从国和检测,而这有赖于建立灵敏、快速和可靠的病毒[2]内外引进种球的数量和批次的不断增长,病毒病开检测方法。目前,检测百合病毒的方法主要有酶[2]始在

8、各百合种植区发生流行。据报道,侵染百合联免疫吸附测定(ELISA)、电镜技术和RT2[1,4]的病毒有20多种但以百合无症病毒(Lilysymp2PCR。这些技术在实际应用上有的方法提纯过tomlessvirus,LSV)、黄瓜花叶病毒(Cucumbermo2程繁琐,耗时长,有的操作繁琐,易于造成污染,出现saicvirus,CM