不同来源的油茶粕蛋白酶解制备ace抑制肽

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1、万方数据3．1．1实验材料与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯173．1．2实验设备与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯173．1．3实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．183．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．203．2．1酶活力的测定结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯203．2．2不同蛋白酶酶解油茶粕蛋白的水解度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯213．2．3油茶粕蛋白单酶水解产物的ACE抑制活性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．223．2．4油茶粕蛋白复合水解产物的ACE抑制活性⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯一233．3本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．244油茶粕ACE抑制肽的分离纯化及其稳定性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．254．1实验材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一264．1．1实验材料与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯264．1．2实验仪器与设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯264．1．3试验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一264．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．294．2．1油茶粕多肽含量的测定结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯294．2．2超滤分级分离后各组分的ACE抑制活性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一304．2．3超滤分离油茶粕ACE抑制肽的单因素试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一304．2．4超滤分离油茶粕ACE抑制肽的响应面分析试验结果⋯⋯⋯⋯⋯324．2．5影响ACE抑制率的响应曲面分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．354．2．6SephadexG．25柱层析法分离纯化油茶粕ACE抑制肽⋯⋯⋯⋯374．2．7油茶粕ACE抑制肽稳定性的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．384．3本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯405结论与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯415．1结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．415．2创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．425．3展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43附录(攻读学位期间的主要学术成果)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．53致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．55万方数据中南林业科技大学硕士学术学位论文不同来源的油茶粕蛋白酶解制各ACE抑制肽1绪论1

5、．1油茶分布及其油茶粕的开发利用1．1．1油茶分布油茶(CamelliaOleiferaAbel)为山茶科植物，被称为世界四大木本食用油料之一，是我国南方特有的一种油料植物。主要分布在淮河．秦岭以南，云南怒江流域。东部油茶种植生长区主要集中在海拔800m以下，西部大多集中在海拔2000m以上的区域【11。1．1．2油茶粕的开发利用我国每年产油茶籽大约l00万吨，榨油后所产生的副产物油茶粕大约60万吨。目前这些油茶粕主要作为清塘剂销往沿海地区的鱼虾养殖场，也有部分企业将油茶粕用于防虫治虫，直接喷洒到果树上。基本上没有得到合理的利用，对于资源困乏的

6、中国是极大的浪费。据文献报道，油茶粕中主要富含蛋白质、茶皂素、糖类和粗纤维。其中含10～14％的茶皂素，这是一种具有生物活性和表面活性的天然产物，有较强的抗氧化性和清除活性羟自由基的能力。广泛应用于乳化剂、洗涤剂、饲料添加剂和农药助剂的制造【2_51。通过发酵的方法除去油茶粕中的茶皂素、单宁和生物碱后，发酵液中的无氮浸出物含量较高，营养价值丰富，能量值也比较高，可用于生产开发生物饲料。油茶粕中含有的10～15％的蛋白质是一种很好的蛋白饲料⋯01，这种蛋白质由17种氨基酸组成，其中包括7种人体必需氨基酸。1．2ACE及ACE抑制肽(ACEI)的作

7、用机理ACE是一种含锌二肽羧基肽酶，其作用机理(如图1．1所示)主要表现在如下两个系统中：一是肾素．血管紧张系统(Renin．AngiotensionSystem，RAS)，ACE将血管紧张素I(AngI)转换为血管紧张素II(AngII)，而AngII可加强心肌的收缩力，使血压升高；二是激肽释放酶．激肽系统(Kalikkrein．KininSystem，KKS)，KKS为降压系统，其中舒缓激肽可增强毛细血管的通透性，使血压下降，而引起高血压的主要原因是ACE和舒缓激肽发生反应，使位于舒缓激肽C末端的二肽Phe．Arg缺失，成为失活片段。从而无

8、法增强毛细血管的通透性，使其无万方数据中南林业科技大学硕士学术学位论文不同来源的油茶粕蛋白酶解制备ACE抑制肽法达到降压的目的。因此，抑制ACE的活性