酶法制备大豆蛋白ACE抑制肽的研究

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1、摘要大豆中蛋白质含量高达40％，氨基酸组成比较合理，必需氨基酸平衡良好。我国大豆资源丰富，原料成本低，所以，大豆分离蛋白的研究与利用己引起人们的关注。大豆多肽是大豆分离蛋白经酶解后产生的分子量较小的化合物，在营养价值与生理功能上都优于大豆分离蛋白。大豆多肽能有效的改善原料蛋白质的不足，达到无豆腥味，具有无蛋白质变性、加热不凝固、酸性不沉淀、易溶于水、流动性好等特点，而且吸收速度快，蛋白质利用率高。大豆多肽还具有降血压的生物活性，这对于一些目前常见的疾病如高血压、冠心病等的预防有着重要的研究意义。为此，本文较系统的研究了大豆分离蛋白的制备和大豆ACE抑制肽的生产条件。由于市售的大豆分离

2、蛋白其添加成分不明确，而且有些有活性成分的添加剂会对ACE抑制活性产生影响，因此本实验采用碱溶酸沉法提取大豆分离蛋白，在单因素试验的基础上确定正交试验的因素和水平，对正交结果进行分析得出了最佳提取条件：pH值为9．0，温度40。C，料液比为1：10。并对产物进行了理化参数的测定和氨基酸分析、热变性分析，为后续的实验提供了依据。论文研究了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protames复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果和ACE抑制活性。水解能力用pn-start法检测，DH％大小依次为Alcalase碱性蛋白酶)Protames

3、复合蛋白酶)Neutrase中性蛋白酶)Flavourzyme风味蛋白酶；ACE抑制活性用高效液相法检测，ACE抑制率强弱依次为Alcalase碱性蛋白酶)Flavourzyme风味蛋白酶)Protames复合蛋白酶)Neutrase中性蛋白酶。综合考虑，选定Alcalase碱性蛋白酶为生产大豆ACE抑制肽的最适酶，并对其酶解条件进行了优化，确定生产大豆ACE抑制肽的最佳条件为：温度60。C，pH值为8．0，【S】=4％，【E】／【S】_4％，D碍％1．14．4％。在最佳生产条件获得的水解产物进行Flavourzyme风味蛋白酶的酶法脱苦，实验结果表明：随着苦味值的降低ACE抑制活性

4、也有所下降，因此不采用此法对水解液进行脱苦处理。通过对酶解产物的氨基酸分析可知，酶解前后的氨基酸组成变化不大，说明与其他化学方法相比，Alcalase碱性蛋白酶酶解生产ACE抑制肽是一种较温和，且安全、无副作用的方法。关键词：大豆分离蛋白，ACE抑制肽，酶解，高效液相AbstractSoybeancontainsabout40％proteinwithwell．balancedaminoacidandenoughessentialaminoacid．InChinathesoybcanresourcesareabundantandthepriceislow．Therefore，thest

5、udyandutilizationofsoybeanproteinisolateshavebeendrawnscientist‘Smuchattention．Soybeanpeptides(SP)arecompoundswithsmallmolecularweightobtMnedfromhydrolysisofsoybeanproteinisolates．StudiesshowedthatSPweresuperiortOsoybeanproteinisolatesinbothnutritionalvalueandphysiologicalfunctions。Comparetosoy

6、beanprotein,soybeanpeptidesdonotshowfishysmell，wouldnotbedenatured，depositedinacidsolution，flocculatedbyheat，andismoresoluble，etc．MoreoveLthesoybeanpeptidesshowmanybiologicalfunctionsuchasloweringbloodpressure，whichsuggestthepotentialuseofsoybeanpeptidestopreventangiocardiopathyandrelateddiseas

7、e．Therefore，thepreparationofsoybcanproteinisolatesandprocedureofACEIproductionfromsoybcanproteinwerestudiedsystematicallyinthiswork．Inthepresentstudy,wedidnotusesoybeanproteinisolatesfrommarketbecausetheycontanadditivesandmanyothe