复合酶法水解豆粕制备ACE抑制肽-论文.pdf

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1、※生物工程宦晶科学2012．Vo1．33,No．09l63复合酶法水解豆粕制备ACE抑制肽李景1，王素英z一，张思憨2，王园2，李吴泽2，林菘2(1．天津天狮学院生物工程学院，天津301700；2．天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津市食品生物技术重点实验室，天津300134)摘要：碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶组合，采用分步法进行水解豆粕实验，以提高豆粕水解液的ACE抑制率。结果表明：当碱性蛋白酶和胰蛋白酶两种酶分步加入进行水解时，水解度最高，达到46．83％。进一步通过响应面分析法，优化碱性

2、蛋白酶和胰蛋白酶组合分步水解条件，发现先加入5lOOU／g碱性蛋白酶，在pH9的条件下水解2h，之后再加入950U／g胰蛋白酶，在pH8的条件下继续水解2h，最终水解产物的ACE抑制率可达到72．21％。关键词：复合酶法；ACE抑制肽；Box．Behnken试验PreparationofAngiotensin·-I-ConvertingEnzymeInhibitoryPeptidesbyMultienzymaticHydrolysisofSoybeanMealLIJing，WANGSu-ying一，ZHANGSi—min，WAN

3、GYuan，LIHao-ze，LINSong(1．DepartmentofBioengineering，TianjinTianshiCollege，Tianjin301700，China；2．TianjinKeyLaboratoryofFoodandBiotechnology，CollegeofBiotechnologyandFoodScience，TianjinUniversityofCommerce，Tianjin300134，China)Abstract：InordertoimprovetheACEinhibitoryra

4、teofhydrolyzedsoybeanmeal，alka~epmteasewasusedincombinationwithneuralprotease，compoundprotease，trypsinorflavorzymeforstepwisehydrolysisofsoybeanmea1．Theresultsshowedthatthehighesthydrolysisdegree，46．83％，wasachievedwhensoybeanmealwassequentiallyhydrolyzedwithalkalinep

5、roteasefollowedbytrypsin．Furtherinvestigationswerecardedouttooptimizethehydrolysisprocessusingresponsesurfaceanalysis．Theoptimalhydrolysisprocesswassequenti~hydrolysiswimneu~flproteasefor2hatadoseof5100U／gfollowedbytrypsinatadoseof950U／gforanother2h．TheACEinhibitoryr

6、ateoffinalhydrolysisproductswas叩t072．21％．Keywords：multienzymctichydrolysis；ACEinhibitorypeptides：Box—Behnkenexperimentaldesign中图分类号：Q814．9文献标识码：A文章编号：1002．6630(2012)09．0163．04食源性AcE抑制肽效果温和、专一、持久，且不同蛋白酶对蛋白质水解有各自的特异性和专一对正常血压无影响，无副作用，因此具有良好的应用性，作用部位因酶而异。中性蛋白酶、碱性蛋白酶属前景【l

7、引。豆粕是豆油加工的副产品，营养物质丰富，内切酶，其中中性蛋白酶的作用位点为疏水性氨基酸含44％左右的粗蛋白及多种矿物质和维生素，但其目前(亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸)，碱性蛋白酶除疏水主要用做饲料，很少应用于高附加值领域【。为使大性氨基酸外，还能水解色氨酸和丙氨酸形成的肽键。胰豆加工副产物豆粕实现资源化高附加值综合利用，并满．．蛋白酶能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切足抗高血压产品市场的需求，前期本实验室选用豆粕作断[91，复合蛋白酶为含有外切酶和内切酶的混合酶。风为原料，采用蛋白酶水解方法制备ACE抑制肽，并从味蛋白

8、酶为具有外切和内切双重作用的混合蛋白酶，能碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、将已溶解的蛋白质和肽进一步水解，且可通过氨肽酶法胰蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶中，筛选出碱性和羧肽酶法控制肽的苦味It0]。单酶水解时由于蛋白酶切蛋白酶为水解豆粕的最佳酶