杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

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1、农产品加工2014年第11期第11期(总第370期)农产品加工No.112014年11月FarmProductsProcessingNov.文章编号:1671-9646(2014)11a-0036-03杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化*付金霞,赵隽,李智博,赵前程,祁艳霞(大连海洋大学食品科学与工程学院,辽宁省水产品加工及综合利用重点试验室,辽宁大连116023)摘要:杂色蛤酶解产物对ACE活性的抑制作用采用马尿酸法测定。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单酶筛选,得出对杂色蛤肉酶解效果最佳的酶是

2、木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,确定木瓜蛋白酶酶解杂色蛤肉制备ACE抑制肽的最优工艺为料液比1∶10,加酶量1.5%,酶解温度45℃,pH值6.0,酶解时间1.5h。酶解产物(10mg/mL)对ACE的抑制率为86.7%,水解度为27.75%。酶解液经超滤,小于6kDa部分(2mg/mL)抑制率最高为52.3%,IC50为1.738mg/mL。关键词:杂色蛤;ACE抑制肽;酶解工艺;超滤技术中图分类号:TQ464.7文献标志码:Adoi:10.3969/jissn.1671-9646(X).20

3、14.11.011HydrolyzationConditionsofACEInhibitoryPeptidefromRuditapesPhilippinarumFUJin-xia,ZHAOJun,*LIZhi-bo,ZHAOQian-cheng,QIYan-xia(KeyLaboratoryofAquaticProductProcessingandUtilizationofLiaoningProvince,CollegeofFoodScienceandEngineering,DalianOceanUn

4、iversity,Dalian,Liaoning116023,China)Abstract:Hippuricmethodisusedtoevaluatetheinhibitoryactivityofangiotensinconvertingenzyme(ACE)fromRuditapesphilippinarum.PapainisselectedfortheoptimalenzymefromfiveproteasesbasedonACEinhibitionrateandthedegreeofhydro

5、lysis.Thehydrolysisconditionsareoptimizedbysinglefactorandorthogonalexperimentsresponse.Theresultsshowthattheoptimumconditionsofhydrolysisaresolid-liquidratio1∶10,1.5%ofpapain,hydrolysistime1.5h,temperature45℃andpH6.0.Onthecondition(10mg/mL),theinhibiti

6、onrateofproductsonACEis86.7%andthedegreeofhydrolysisis27.75%.Useofultrafiltrationonhydrolyzateforinitialseparation,themolecularweightoflessthan6kDacomponentshashighestACEinhibitorywithIC50andinhibitionrate(2mg/mL)are1.783mg/mLand52.3%,respectively.Keywo

7、rds:Ruditapesphilippinarum;ACEinhibitorypeptides;hydrolysisprocess;ultrafiltration血管紧张素转化酶抑制剂(Angitotensinconvert-杂色蛤,购于大连黑石礁早市;血管紧张素转化ingenzymeinhibitor,ACEI)通过抑制ACE的活性,酶(ACE)、马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)、甲醇(色[1]达到降血压的作用。食源性降血压肽是从天然食物谱纯),Sigma公司产品;其他化学试剂均为分析纯。中分离得到的

8、ACE抑制剂,具有降压效果持久、无1.2方法[4]副作用、安全性高等优点,在医学研究等领域已成1.2.1杂色蛤酶解工艺流程[2]为研究热点。杂色蛤,学名菲律宾蛤仔(Ruditapes杂色蛤蛤肉→称质量、匀浆→调pH值→加酶→酶解→沸philippinarum)为我国近海四大养殖贝类之一,在我水浴灭酶15min→调pH值7.0→9000r/min离心,取上清国沿海资源丰富[3]。本文通过单酶筛选试验、单因素液→浓缩,冻干→指标测定。试验和正交试验,确定酶解

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